Wie ist das Messgerät für die Elektrophorese aufgebaut?
Es besteht aus Anode und Kathode, dazwischen eine enge Röhre.
Wie funktioniert die Zonenelektrophorese?
Man gibt einen schmalen Streifen mit Analyten (Messproben) in das Separationssystem, dieses ist mit einem homogenen kontinuierlichen Hintergrundelektrolyten gefüllt. (Leitfähigkeit und Pufferung)
Es gilt cpuffer >> canalyt
Somit ist der Einfluss der Analyten vernachlässigbar.
Danach Eingabe der Analyten als scharfe Bande, somit einzige Diskontinuität
Dadurch wird im E-Feld getrennt nach muep (kein Gleichgewichtszustand!)
Wie funktioniert die Isotachophorese?
Die Probe wird zwischen zwei Puffern eingegeben. Das Leitelektrolyt (leading buffer) hat eine sehr hohe elektrophoretischen Mobilität, der Endelektrolyt (terminal buffer) hat eine sehr niedrige.
Dadurch gibt es Zonen mit unterschiedlich starkem elektrischen Feld, welche die einzelnen Analyten entweder abbremsen oder beschleunigen. Dadurch werden sie ihrer elektrophoretischen mobilität nach aufgeteilt.
Es bilden sich selbst schärfende Banden.
Wie funktioniert die Isoelektrische Fokussierung?
Was ist Diffusion, was spielt da eine Rolle, was sagt das ficksche Gesetz?
Diffusion: Verbreiterung aufgrund thermodynamischer Bewegung, Verstärkung durch konzentrationsgradienten.
Ficksches Gesetz:
Ji=-D dci/dx -> Strom = Diffusionskoeffizient mal Gradient der Konzentration
-> Die Verbreiterung ist stärker für kleinere Moleküle und höhere Temperaturen
Was ist Adsorption und wozu führt sie?
Adsorption verbreitert die Banden.
Sie hängt ab vom Radius, der Größe der Moleküle und der Länge der Kapillare (einiges mehr, Gleichung kompliziert)
Es ist die Anreicherung an der Oberfläche.
Was ist Joule Heating, warum spielt es hier eine Rolle, welche ist diese?
Diese Wärme entsteht immer wenn elektrische Felder für Transport genutzt werden. Ein Stromfluss erzeugt Wärme.
Problem: Viskosität fällt, Diffusion nimmt zu. Ein Temperaturgradient entsteht und dadurch konvektive Strömungen welche diesen Ausgleichen wollen.
Also ein Verzerrung der Bande.
Was ist Eddy Dispersion? Wie funktioniert sie?
Verformung des Plugs innerhalb des Mediums, dadurch bei stärkerer Verformung langsamere Geschwindigkeit.
Dies liegt daran, dass sie innerhalb der Mikrostrukturen oder aber innerhalb eines Gels nur bestimmte Wege nehmen können.