Histologie, BMA HF

Färbungen, Farbstoffe

Färbungen, Farbstoffe

Ramona Hausmann

Ramona Hausmann

Kartei Details

Karten 34
Lernende 34
Sprache Deutsch
Kategorie Medizin
Stufe Grundschule
Erstellt / Aktualisiert 02.03.2014 / 23.10.2023
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Unterschied chromophore und auxochrome Gruppen?

Chromophor=Farbträger: charakteristische Strukturen, welche eine organische Verbindung farbig erscheinen lässt

 Benzol + Ethylen oder Azo oder Imin oder Carbonyl oder Nitro -> farbige Verbindung

auxochrom=farbvertiefend: Farbe wird sichtbar und Verbindung zw. Farbstoff und zu färbendem Matrial wird

hergestellt. verleihen dem Farbstoffmolekül eine elektrische Ladung             

Nitrobenzol + Hydroxylgruppe (Sulfatyl o. Carboxyl o. Amino...) -> Intensivgelb

Ein Farbstoff wird erst sichtbar wenn man zur chromophoren eine auxochrome Gruppe dazu gibt

 

Indifferente Farbstoffe

ohne elektrische Ladung, meist unlöslich in Wasser, werden von Lipidstrukturen gebunden

Direkte substantive Färbung

Farbstoff färbt ohne weiteren Zusatz und ohne Vorbehandlung des Gewebes

Gewebe + Farbstoff

Indirekte adjektive Färbung

braucht ein Vermittler zwischen Farbe und Gewebe -> Akzentuator

Farbstoff + Metallsalz (Akzentuator) = Farblack

Farblack + Gewebe

Physikalische Färbung

Löslichkeit: unterschiedliche löslichkeit der Farbstoffe in verschiedenen Lösungsmittel (Fettfärbung)

Dispersität: unterschiedlich grosse Farbstoffteile diffundieren unterschiedlich schnell in die entsprechenden Strukturlücken des Gewebes, Zeitfaktor spielt eine Rolle (Bindegewebsfärbung)

Chemisch-physikalische Färbung

elektrostatische Adsorption: Ausgleich unterschiedlicher Ladung im Gewebe und Farbstoff (Kernfärbung)

Grenzflächenadsorption: stark aufgeraute Oberflächen können Substanz ohne elektrische Kräfte fest halten (Elastika Färbung)

Unterschied Progressiver und Regressiver Färbung?

Progressiv: es wird bis zum Optimum gefärbt, danach abgebrochen

Regressiv: zuerst überfärbt, danach durch Differenzierungsvorgang überschüssige Farbanteile entfernen

Unterschied Simultan und Sukzedan Färbung?

Simultan: mehrere Farbstoffe werden gleichzeitig angeboten -> differenzierte Anfärbung unterschiedlicher Gewebestrukturen mit den einzelnen Farbstoffen

Sukzedan: Mehrere Farbstoffe werden nacheinander angeboten

Was ist das Bläuen?

Hämateinlack gefärbte Schnitte werden unter fliessendem Wasser gewaschen.

zuerst pH 3 -> rot danach neutral -> blau

geht durch zugabe von Ammoniak oder Lithiumcarbonat schneller

Was sind Kernfarbstoffe? +Beispiele

sind positiv geladen und sind daher basische Farbstoffe, sie lagern sich an negativ geladene Phosphatgruppen der DNS des Zellkerns an

Bsp. Hämalaun, Eisenhämatoxilin, Kernechtrot, Azokarmin

Woraus besteht der Farbstoff Hämalaun und wie wird er Hergestellt?

aus Hämatoxylin und einem Metallsalz

Hämatoxylin wird aus der Rinde eines Blauholzbaumes gewonnen, dieses wird oxidiert zu Hämatein (wirksamer Farbstoff)

Hämatein + Kalialaun -> Hämalaun

Was ist Eisenhämatoxylin und wie wird es Hergestellt?

Kernfarbstoff wirs aus Hämatoxylin und Metallsalz hergestellt (Wie Hämalaun)

Als Metallsalz verwendet man jedoch Eisensalze

Gefahr von Überoxidation -> Farblösung und Metallsalz werden kurz vor dem Färben gemischt (nur 5 Tage haltbar)

Woraus besteht Kernechtrot?

saurer Farbstoff mit Aluminiumsulfat als Metallsalz

Hintergrund wird auch leicht angefärbt -> es hat noch freie Farbpartikel welche sich mit dem Zytoplasma verbinden

Was ist Azokarmin?

ein saurer Farbstoff ohne Metallsalz

färbt basische Proteine (Histone) im Zellkern an. Das restliche Gewebe wird auch angefärbt, dies muss man durch differenzierung wieder entfärben

Was sind Plasmafarbstoffe? + Bsp.

sie sind sauer, negativ geladen und binden an positiv geladene Gewebeelemente

der pH-Wert der Färbelsg. spielt eine Rolle um Anfärbbarkeit von Strukturen zu erhöhen, zu unterdrücken oder möglich zu machen.

Kontrast zwischen Kern und Plasma entsteht durch vorherige Kernfärbung

Bsp.: Eosin, Orange G, Säurefuchsin, Anilinblau, Pikrinsäure, Lichtgrün

Was ist Eosin?

Wird als Gegenfärbung gebraucht, sythetisch hergestellter roter Farbstoff mit gelbgrünem Fluoreszens-schimmer

saurer Plasmafarbstoff, ist Wasser und Alkohol löslich, färbt Cytoplasma, Bindegewebe, Kollagenfasern, Muskeln in versch. rottönen an

Für was ist die PAS-Färbung gut?

Färbt Kohlenhydratanteile
(Neutrale und saure Mucopolysaccharide, Glykogen)

Färbt Basalmembran (in Niere), Pilze..

 

Prinzip der PAS-Färbung?

Vorhandene Hydroxylgruppen der Polysaccharide werden mit Perjodsäure zu freien Aldehydrgruppen oxidiert

Welche Faktoren muss man bei der PAS-Färbung berücksichtigen?

Konzentration der Perjodsäure (0,5-2,5)

Die Zeit (für optimale oxydation)

Die Temperatur (bei zu hoher Temp. bleibt Oxydation nicht auf Aldehydstufe stehen)

Für was spült man mit Kaliumdisulfit bei der PAS-Färbung?

Um überschüssiges Schiff's Reagenz zu entfernen und um falsch positive Ergebnisse zu verhindern durch angelagerten Farbstoff an andere Gewebselemente

Wo kommen Neutrale Mucopolysaccharide vor?

Magen, Darm, Bronchien, Speicheldrüsen, Zelloberfläche, Schilddrüse, Pilze, Bestandteil der Basalmembran

 

Wo kommt Glykogen vor?

Leberzellen, Muskelzellen

Wo kommen saure Mucopolysaccharide vor?

Darm, Bronchien, Speicheldrüsen, Bindegewebe (sehr schwach)

Für was ist die Alcianblau-Alkalisch (AB-ALK) Färbung? Wozu dient Alk. NaOH und Essigsäure?

färbt Saure Mucosubstanzen an. Idealer pH bei 2,5

Schnitte werden zuerst mit 3% Essigsäure angesäuert, damit sich der pH-Wert der Farblsg. nicht zu schnell verändert

die alkoholische Natronlauge stabilisiert die Farbe in den sauren Mucosubstanzen

Welche bestandteile werden wie angefärbt? (AB-ALK-Färbung)

saure mucosubstanzen türkisblau

Kerne rot

Welche bestandteile werden wie angefärbt? (PAS-Färbung)

PAS-Positive Substanzen rotviolett

Kerne blau

Cytoplasma blass-rosa

Welche Bestandteile werden wie angefärbt? (Azan-Färbung)

Kerne --> rot

BG, Schleim --> blau

Muskel --> rötlich-orange-violett

Ec --> Rot-orange

Zellgranula --> blau, rot, orange

Welche Bestandteile werden wie angefärbt? (Mass-Tri)

Kollagene Fasern --> grün

Muskel, Ec, Fibrin --> rot

Kerne --> braun-schwarz

Welche Bestandteile werden wie angefärbt? (EvG)

Elastische Fasern --> violett-schwarz

Kollagen --> rot-pink

Muskel, Ec --> gelb (ockergelb)

Kerne --> braun-schwarz

Für was braucht man Bouin?

zur Umfixierung von Formalin fixiertem Gewebe vor dem Färben --> Farbmoleküle können besser eindringen

bei Mass-Tri Färbung

Für was ist die Phosphorwolframsäure?

dient als grobdisperses Differenzierungsmittel -> feindisperser Farbstoff wird aus groben Strukturen verdrängt

und als Beize (aufrauen der Oberfläche, damit Farbstoff besser haften kann)

bei Mass-Tri und Azan Färbung

Was stellt man mit Resorcin-Fuchsin dar? (EvG-Färbung)

elastische Fasern (aus elastin und Fibrillin), sie sind stark sauer und binden den Feindispersen Beizen-Farbstoff

es ist eine regressive sukzedan Färbung

Was färbt man mit dem Pikrofuchsin? (EvG)

Aus Pikrinsäure und Säurefuchsin

hochkonzentrierte Pikrinsäure ist feindispers und färbt Muskeln und Cytoplasma

schwaches Säurefuchsin ist grobdispers und färbt Bindegewebe an

es ist eine Progressive simultan Färbung

Was färbt das Ponceau-Fuchsin? (Mass-Tri)

dient zur anfärbung von Muskeln und Cytoplasma

zwei feindisperse saure Farbstoffe: Ponceau de Xylidine und Säurefuchsin

es ist eine regressive sukzedan färbung