Histologie, BMA HF

Um überschüssiges Schiff's Reagenz zu entfernen und um falsch positive Ergebnisse zu verhindern durch angelagerten Farbstoff an andere Gewebselemente

Magen, Darm, Bronchien, Speicheldrüsen, Zelloberfläche, Schilddrüse, Pilze, Bestandteil der Basalmembran

Leberzellen, Muskelzellen

Darm, Bronchien, Speicheldrüsen, Bindegewebe (sehr schwach)

färbt Saure Mucosubstanzen an. Idealer pH bei 2,5

Schnitte werden zuerst mit 3% Essigsäure angesäuert, damit sich der pH-Wert der Farblsg. nicht zu schnell verändert

die alkoholische Natronlauge stabilisiert die Farbe in den sauren Mucosubstanzen

saure mucosubstanzen türkisblau

Kerne rot

PAS-Positive Substanzen rotviolett

Kerne blau

Cytoplasma blass-rosa

Kerne --> rot

BG, Schleim --> blau

Muskel --> rötlich-orange-violett

Ec --> Rot-orange

Zellgranula --> blau, rot, orange

Kollagene Fasern --> grün

Muskel, Ec, Fibrin --> rot

Kerne --> braun-schwarz

Elastische Fasern --> violett-schwarz

Kollagen --> rot-pink

Muskel, Ec --> gelb (ockergelb)

Kerne --> braun-schwarz

zur Umfixierung von Formalin fixiertem Gewebe vor dem Färben --> Farbmoleküle können besser eindringen

bei Mass-Tri Färbung

dient als grobdisperses Differenzierungsmittel -> feindisperser Farbstoff wird aus groben Strukturen verdrängt

und als Beize (aufrauen der Oberfläche, damit Farbstoff besser haften kann)

bei Mass-Tri und Azan Färbung

elastische Fasern (aus elastin und Fibrillin), sie sind stark sauer und binden den Feindispersen Beizen-Farbstoff

es ist eine regressive sukzedan Färbung

Aus Pikrinsäure und Säurefuchsin

hochkonzentrierte Pikrinsäure ist feindispers und färbt Muskeln und Cytoplasma

schwaches Säurefuchsin ist grobdispers und färbt Bindegewebe an

es ist eine Progressive simultan Färbung

dient zur anfärbung von Muskeln und Cytoplasma

zwei feindisperse saure Farbstoffe: Ponceau de Xylidine und Säurefuchsin

es ist eine regressive sukzedan färbung

ohne elektrische Ladung, meist unlöslich in Wasser, werden von Lipidstrukturen gebunden

Farbstoff färbt ohne weiteren Zusatz und ohne Vorbehandlung des Gewebes

Gewebe + Farbstoff

braucht ein Vermittler zwischen Farbe und Gewebe -> Akzentuator

Farbstoff + Metallsalz (Akzentuator) = Farblack

Farblack + Gewebe

Löslichkeit: unterschiedliche löslichkeit der Farbstoffe in verschiedenen Lösungsmittel (Fettfärbung)

Dispersität: unterschiedlich grosse Farbstoffteile diffundieren unterschiedlich schnell in die entsprechenden Strukturlücken des Gewebes, Zeitfaktor spielt eine Rolle (Bindegewebsfärbung)

elektrostatische Adsorption: Ausgleich unterschiedlicher Ladung im Gewebe und Farbstoff (Kernfärbung)

Grenzflächenadsorption: stark aufgeraute Oberflächen können Substanz ohne elektrische Kräfte fest halten (Elastika Färbung)

Progressiv: es wird bis zum Optimum gefärbt, danach abgebrochen

Regressiv: zuerst überfärbt, danach durch Differenzierungsvorgang überschüssige Farbanteile entfernen

Simultan: mehrere Farbstoffe werden gleichzeitig angeboten -> differenzierte Anfärbung unterschiedlicher Gewebestrukturen mit den einzelnen Farbstoffen

Sukzedan: Mehrere Farbstoffe werden nacheinander angeboten

Hämateinlack gefärbte Schnitte werden unter fliessendem Wasser gewaschen.

zuerst pH 3 -> rot danach neutral -> blau

geht durch zugabe von Ammoniak oder Lithiumcarbonat schneller

sind positiv geladen und sind daher basische Farbstoffe, sie lagern sich an negativ geladene Phosphatgruppen der DNS des Zellkerns an

Bsp. Hämalaun, Eisenhämatoxilin, Kernechtrot, Azokarmin

aus Hämatoxylin und einem Metallsalz

Hämatoxylin wird aus der Rinde eines Blauholzbaumes gewonnen, dieses wird oxidiert zu Hämatein (wirksamer Farbstoff)

Hämatein + Kalialaun -> Hämalaun

Kernfarbstoff wirs aus Hämatoxylin und Metallsalz hergestellt (Wie Hämalaun)

Als Metallsalz verwendet man jedoch Eisensalze

Gefahr von Überoxidation -> Farblösung und Metallsalz werden kurz vor dem Färben gemischt (nur 5 Tage haltbar)

saurer Farbstoff mit Aluminiumsulfat als Metallsalz

Hintergrund wird auch leicht angefärbt -> es hat noch freie Farbpartikel welche sich mit dem Zytoplasma verbinden

ein saurer Farbstoff ohne Metallsalz

färbt basische Proteine (Histone) im Zellkern an. Das restliche Gewebe wird auch angefärbt, dies muss man durch differenzierung wieder entfärben

sie sind sauer, negativ geladen und binden an positiv geladene Gewebeelemente

der pH-Wert der Färbelsg. spielt eine Rolle um Anfärbbarkeit von Strukturen zu erhöhen, zu unterdrücken oder möglich zu machen.

Kontrast zwischen Kern und Plasma entsteht durch vorherige Kernfärbung

Bsp.: Eosin, Orange G, Säurefuchsin, Anilinblau, Pikrinsäure, Lichtgrün