Zellkultutechnik

Nennen Sie mind. 4 wichtige Bestandteile des bei HeLa-Zellen verwendeten Standardmediums.

Erläutern Sie kurz die Zielsetzung des Versuches "Plating efficiency".

Beschreiben Sie vollständig das Passagieren einer HeLa-Zellkultur und gehen Sie dabei auf die Funktion der einzelnen Lösungen/Schritte ein.

Ordnen Sie die jeweiligen Abb. Den Stadien der M-Phase des Zellzykluses zu und beschriften Sie die dargestellten Phasen und Pfeile.

Im Versuch Zellsynchronisation und Transfektion wurden die Zellen mit EtOH fixiert. Geben Sie für beide Versuche jeweils konkret an, warum dies notwendig war und erläutern Sie.

Wie gehen sie technisch vor, wenn sie folgende Fragestellung vor sich haben?

a) Sie wollen die Effizienz ihrer Transfektion bestimmen und im Anschluss dieselben Zellen weiterkultivieren. geben sie eine Methode an und erläutern sie kurz die Vorgehensweise. 

b) Sie haben Zellen aus dem Gewebe isoliert und damit ein Gemisch aus verschiedenen Zelltypen erhalten. Diese muss nun effizient und Zellschonend aufgereinigt werden, damit sie eine nahezu reine Zellkultur erhalten. Geben sie eine Methode an und erläutern sie kurz ihre Vorgehensweise.

Stellen sie ein Verdünnungsschema auf. Sie nutzen dafür ausschließlich Glaspipetten mit einem min Pipettiervolumen von 0,5 ml. geben sie alle Verdünnungsschritte in Form eines Pipettierschemas an. Welches Endvolumen liegt in dem Röhrchen vor, um die Zielbedingungen zu erfüllen? 

Ausgangszellzahl: 2,5 x 10⁶ in 5 ml

Ziel: 1x10³ Zellen in einer Konzentration von 5 x 10² Zellen/ml.