Mikrobiologie

Kultiviermethoden überimpfen Keimzahlbestimmung Grenz- und Tolzeranzbestimmungen Grobdifferenzierung

Kultiviermethoden überimpfen Keimzahlbestimmung Grenz- und Tolzeranzbestimmungen Grobdifferenzierung

Désirée Keller

Désirée Keller

Kartei Details

Karten 21
Sprache Deutsch
Kategorie Berufskunde
Stufe Berufslehre
Erstellt / Aktualisiert 06.09.2014 / 28.04.2022
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Welche Kultivierungsmethoden gibt es?

Reagnzglas- und Plattenkulturen

Welche Arten der Kultivierung gibt es?

Flüssigkultur: flüssiges Allgemein-Medium
Agarschrägkultur: Anzucht auf der Agaroberfläche eines Agar-Schrägröhrchens
Stichkultur: Kultur in einer Festen oder halbfesten Agarmediums in einem Reagenzglas; Beimpfung durch Stich mit der Impfnadel
Plattenausstrich: Kultur auf der Oberfläche eines festen Agarmediums
Gusskultur: Kultur in einem festen Agarmediums durch vermischen der Probe mit dem noch flüssigen Agar

Erkläre die Flüssigkultur

Impfnadel in flüssigem Impfmaterial tunken und nachher in sterile Nährlösung rühren

danach bei 30°C zwei Tage bebrüten dann auswerten

Was ist ein Depot ein Ring oder eine Trübung?

Depot: Bakterien setzen dich am Boden ab
Ring: Bakerien sind etwas oberhalb der Agaroberfläche
Trübung: Agar ist von den Bakterien getrübt

Erkläre die Stichkultur?

Impfnadel in Impfmaterial rühren dann in festen Agar stechen

Dann 2 Tage bebrüten bei 30°C auswerten

Was was sind aerobe Bakterien, fakultative anerobe Bakterien und anaerobe Bakterien?

aerob: brauchen Luft
fakultative anaerobe: Brauchen nicht unbedingt Luft
anaerob: brauchen keine Luft

Erkläre die Drei-Öse-Ausstrichmethode

mit der Öse in das Impfmaterial und umrühren dann auf den Agar drei Striche machen dann sterile Öse nehmen und am Ende wieder drei Stiche machen, dann dieser Vrogang wiederholen

Was kann man aus dieser Drei-Öse-Aussrichmethode schliessen?

ob es einzelne Kolonien sind oder ob es eine Reinkultur ist

Erkläre das Prinzip der Verdünnungsreihe?

Das Prinzip ist dass man eine auswertbare Kolonienzahl bekommt

Erkläre die Durchführung einer Verdünnungsreihe

1ml der Probe in eine 9ml sterile Verdünnungslösung geben und mischen, dieser Vorgang wiederholen ca. 6 mal dann von 4-6 ein Augussverfahren machen

Erkläre das Plattengussverfahren

1ml der Probe in eine Platte geben aufüllen mit einem Nährmedium

Wie wertet man die Gussplatten aus?

Die Kolonien zählen vonden 3 Gussplatten Gussplatte 4 z$hlt 100% gussplatt 5 zählt 10% und gussplatte 6 zählt 1%
Die Kolonienzahlen zusammenzählen und dann durch 111% teilen dann mal 10rechnen, falls Platte 4 nicht zählbar ist dann wird Platte 5 100% und Platte 6 1l 10% und man teilt dann durch 110% und mal 105

Was ist der Unterschied zwischen der Gesammtzellzahl und den kolonienbildenden Einheiten?

Die Gesammtzellzahl wird mikroskopisch bestimmt es sind die toten oder lebenden also nicht mehr vermehrungsfähigen Zellen der MO
die kolonienbildenden Einheiten werden kulturell bestimmt es sind die vermehrungsfähigen MO
Dabei überleben nur die bakterien, die die Aufbereitung der Probe, die Bebrütungstemperatur und die aerob oder fkultativ aerob angepasst sind

Was ist bei der Probenerhebung wichtig?

Es kommt aus das Untersuchungziel an aber es muss alles steril sien, da man sonst falsche MO in der Probe hat die Probe sollte bis zur Untersuchung kühl transportiert und schnell untersucht werden

Was ist der Grenz und was ist der Toleranzwert?

der Grenzwert bezieht sich uaf die Anzahl Bakterien, die es im Produkt haben darf ohne dass es gesundheitliche Schädigungen gibt
Der Toleranzwert bezieht sich auf die Anzahl MO die es nicht überschreiten darf, wenn die Rohstoffe sorgfältig ausgewählt werden, sonst gilt die Ware als vermindert

In welche 3 Gruppen werden die Proben unterteilt?

Homogene flüssige Probe
homogene feste Probe
Inohmogene Probe

Wie untersucht man eine homegene flüssige Probe?

kann direkt als unverdünnte Stammlösung genutzt werden und man kann direkt eine verdünnungsreihe starten danach macht man ein Gussplattenverfahren

Wie untersucht man eine homogene feste Probe?

10g der Probe mit der 9 fachen Menge verdünnungslösung homogenisieren danach eine Verdünnung von 10-1 abtrennen und eine Verdünnungsreihe machen danach nach dem Plattengussverfahren machen

Wie untersucht man eine inhomogene feste Probe?

40-100g der Probe abtrennen dann die gleiche Menge Verdünnungslösung hpomogenisieren 20g der homogenisierten Lösungabtennen und mit 80g Verdünnungslösung homogenisieren danach 10-1 von der Lösung abtrennen und eine Verdünnung machen danach wieder ein Plattengussverfahren

Erkläre die Membranfiltermethode

Man muss den Filter sowie den Agar nach dem Getränk und den MO auswählen die man untersuchen möchte danach muss man den Vakuumfilterschlauch abflammen. Den Membranauf den Filter legen dann den Trichter aufsetzen. 100 ml der Flüssigkeit einfüllen und den Hebel umlegenund warte bis die Flüssigkiet weg ist. dann den Membran wegnehmen und auf den Agar legen

Beschreibe das Vorgehen bei der Grobdifferenzierung der Bakterien

Makroskopische Beurteilung:
Farbe: Gelb, Blau
Geruch: Erdig, schweissig
Oberfläche: Glattglänzend, rau-stumpf
Kolonie-Rand: glatt, verästelt
Profil: Flach, halbkugelförmig

Mikroskopische Beurteilung:
Morphologie: Stäbchen, Kokken
Zellverbände: Haufen, Ketten
Beweglichkeit
Endosporenbildung: Form, Länge

Gram-Test:
Erlaubt die Differenzierung von Gram-positiv und Gram-negativen Bakterien

Katalase-Test:
Bakterien spalten Wasserstoffperoxid was man an kleinen Bläschen erkennen kann, dann war der Test positiv

Oxidase-Test:
Anareobe Bakterienl, die die Energie aus der Atmung gewinnen besitzen das Enzym Oxidase

Oxidations-/Fermentationstest
Bestimmte Zucker werdên von bestimmen Bakterien oxidativ fermentativ oder gar nicht gespalten, gleichzeitig wird die anfallende Säurebildung untersucht