Fachenglisch Haematology and Hemostasis

• DNA stärker kondensiert.
• Genarme Region.
• AT-reiche Sequenzen.
• Färbt sich dunkler.

• DNA weniger kondensiert.
• Genreiche Region.
• Hoher CG-Gehalt.
• Färbt sich heller.

Die Banden werden vom Zentromer nach aussen durchnummeriert.

Sehr kurzer p-Arm.

Zentromer nahe am Ende.

p-Arm etwas kürzer als der q-Arm.

p- und q-Arm in etwa gleich lang.

Das Zentromer liegt in der Mitte des Chromosoms.

Homologe Chromosomen sind nicht identisch. Sie können verschiedene Allele tragen.

Schwesterchromatiden sind identisch.

Sie werden während der S-Phase (Replikation) gebildet und werden durch das Zentromer zusammengehalten.

Die Zytogenetik beschäftigt sich mit der Darstellung der Analyse der Chromosem.

Beim Menschen: normaler Chromosomensatz besteht aus 22 Paaren autosomaler Chromosomen und 2 Geschlechtschromosomen (46, XX und 46, XY).

Numerische und oder strukturelle Veränderungen der Chromosomen können Ursache verschiedener Erkrankungen sein.

Menschlicher Chromosomensatz

2N = 46 Chromosomen

Frau: 44 + XX

Mann: 44 + XY

• Grösse der Chromosomen.
• Lage des Zentromers.
• 7 verschiedene Gruppen A bis G.
• Innerhalb der Gruppen nach Bänderung.

G-Bands by trypsin using Giemsa.

Protein des Chromatins wird mit Trypsin verdaut.

DNA:

• Früh-replizierende, locker gepackte Regionen, GC-reich -> helle G-Banden.
• Spät-replizierende, dicht gepackte Regionen, AT-reich -> dunkle G-Banden.

Farblos

• GC-reich.
• Viele exprimierte Gene.
• Viele Alu-Repeats.

• AT-reich.
• Wenig exprimierte Gene.
• Viele L1-Repeat-Sequenzen.

Lebende Zellen:

• Blutzellen (peripheres Blut, Knochenmark).
• Fibroblasten (z.B. Haut, Abortgewebe).
• Amnionzellen (AC), Chorionzotten (CVS).
  • Heparinblut ist geeignet. EDTA hemmt das Zellwachstum.

ungeignet:

• Mundschleimhautabstrich.
• Formalin fixiertes Material.
• Blut im Serumröhrchen.

M-Phase (1h):

Eigentliche Teilungsphase (Mitose), danach Interphase mit weiteren Unterteilungen.

Interphase G1-Phase: Im Anschluss and die Zellteilung. Zellwachstum, RNA- und Proteinsynthese.

Interphase S-Phase: Verdoppelung (Replikation) der DNA, Synthese von Histonen.

Interphase G2-Phase: Postsynthetische bzw. prämitotisches Intervall, Korrektur von Replikationsfehlern.

Phythämagglutinin ist ein Mitogen für Lymphozyten und wird dem Zellkulturansatz beigegeben um die Mitose zu fördern. Es agglutiniert Erythrozyten und stimmuliert T-Zellen.

Hemmt den Spindelaparat (Spindelfasern) und blockiert die Mitose in der Metaphase.

Ein Syndrom bezeichnet eine Kombination von verschiedenen Krankheitszeichen (Symptomen), die typischerweise gleichzeitig und gemeinsam auftreten. Dieser Symptomverband kommt überzufällig oft vor.

Der Ploidiegrad gibt die Anzahl der Chromosomensätze in einer Zelle an.

euploid = vollständiger Chromosomensatz

diploid = 2n doppelter Chromosomensatz, n=46, die meisten Körperzellen des Menschen.

haploid= 1n einfacher Chromosomensatz, n=23, Keimzellen

Aneuploid = Genommutation, numerische Chromosomenaberration (Monosomie, Trisomie).

triploid = 3n=69

Tetraploid= 4n=92

Pränatal:

• Mütterliches Alter.
• Auffälliger Ultraschallbefund.
• Bekannte familiäre Chromosomenstörung.

Kinder:

• Verdacht auf Down-Syndrom.
• Geistige Retardierung.
• Dystrophie (Fehlwuchs).
• Genitalanomalie.
• Wachstumsauffälligkeiten.

Erwachsene:

• Fertilitätsstörungen.

Postnatal:

• Bekannte familiäre Chromosomenstörungen.
• Tumor/ Leukämien.

Spontanaborte 50%.

Totgeburten 5%.

Lebendgeburten 0.5%.

Die Mehrheit der unbalancierten Störungen sich schon bei der Gametenreifung einen Letalfaktor dar.

• Occulte Aborte >50%.
• Fehlgeburten insgesamt 30%.
• Frühkindliche Todesfälle 5-7%
• Angeborene Fehlbildungen 4-8%.
  • Herzfehler 13%
  • multiple Fehlbildung und MR 5%
• Männliche Infertilität 2% in der männlichen Gesamtpopulation, 15% bei Azoospermikern.
• Störungen der weiblichen Pubertät 27%.
• Habituelle Aborte 2-5%.

Numerische Chromosomenaberrationen

Anzahl, z.B Trisomie 13, 18, 21, Triploidien.

Zu den Genomaberrationen zählen sowohl Triploidien und Tetraploidien das zusätzliche Auftreten ganzer Chromosomensätze, als auch Aneuploidien.

• Genomweite Analyse auf Duplikation, Deletion, Amplifikation.
• Automatisierbar.
• Wenig DNA erfoderlich (ca. 0.5-1ug).
• Höhere Auflösung im Vergleich zur konventionellen CGH - Auflösung ist abhängig von der Anzahl der Oligonukleotide.
• Verknüpfung mit Datenbanken möglich.

• Keine Detektion von Translokationen, Inversionen.
• Keine Detektion von Polyploidien.
• Nachweis von Mosaiken ab einer Grösse von 10%.
• CNV sind abzuklären (Eltern).

47,XX,+21

1:500 - 1:800

Organische Fehlbildung

40% Chromosomenbefund scheinbar normal.

60% Chromosomenbefund abnorm.

• Trisomie (+16, +22) 30%
• Ulrich Turner Syndrom 10%
• Triploid 5%
• andere 5%

47,XXX

Schrukturelle Chromosomenaberrationen (mikroskopisch sichtabe Änderungen am Chromosom).

Ca. 50% der Strukturellen Chromosomenaberrationen sind den novo.

NAchweis: Chromosomenanalyse (Bandenmuster), Molekulare Zytogenetik (FISH).

Häufigkeit: Seltener als Genommutationen (Aborte).

Deletionen: Terminelle Deletion (Ringchromosom), Interstitielle Deletion.

Translokationen: Reziproke Translokation, Robertsonsche Translokation, Insertionale Translokation.

Inversionen: Perizentrische Inversion, Parazentrische Inversionen.

Duplikationen: Direkte Duplikation, Indirekte Duplikation, Sonderform: Markerchromosom.