Pflanzenkulturtypen und deren Etablierung

• Gewebekultur
• bedingt eine vorgängige Oberflächensterilisation

Durch steriles verletzen von Pflanzenmaterial. Platzieren des Explanates auf einem festmedium (mit wachstumshormonen) und Inkubation (25°C, Petrischale, dunkel oder leichte Beleuchtung). Verdopplungszeit um 7 Tage bei sigmoidem Wachstum (bröckliger Kallus). Alle 3-4 Wochen subkulturen machen weil es ansonsten zu morphogenetischen Veränderungen kommt. 

Vorsterilisation: Reinigen mit Leitungswasser und Abreiben mit Ethanol

Sterilisation: Einlegen in 0.5% bis 10%ige Hypochloridlösung mit Zusätzen für 5-30 min.

Nachsterilisation: 3 maliges wachen mit sterilem Wasser

Verholztes Material zusätzlich Ultraschallbehandlung

1. Ohne Licht Inkubiert
2. Mit Licht inkubiert
3. höchste Zeit für Subkultur
4. Problematisch: Lösung Methode nach Evans verwenden. Anwendung eines Festmediums mit erhöhter Auxinkonzentration, Zugabe von Pectinase in flüssiges Wachstumsmedium bzw. wiederholte Passagen in flüssigem Wachstumsmedium 

• in flüssigem Nährmedium kultivierte Kallusfragmente
• Zeigen Wachstumsraten über 10g/d Frischgewicht
• Verdopplungszeit von 0,5-5 Tage
• Subkulturen alle 8 bis 14 Tage

• 1/3 Inokulum aus Stammkolben zu 2/3 frischem Wachstumsmedium geben
• Alle vierteljahre sigmoides Wachstum, genetische Stabilität für Wachstum und Produktbildung überprüfen 
• Langzeithaltbarmachung (max. 6 Monate)
  • T-Flasche mit 3-fachem Saccharosegehalt im Medium in Kühlschrank lagern

• Zellteilung wird vermindert
• Zellelongation aktiviert → Änderung der Morphologie möglich
• Neigt zu genetischer Instabilität mit zunehmender Kultivierungszeit

• Durch Sekretion extrazellulären Polysacchariden nach der Zellteilung
• in späteren Wachstumsphasen

Folgen

• Sekundärmetabolitproduktion unterstützen
• Kann Sauerstoff- und Nährstofflimitationen während des Wachstums verursachen

Sind auf Agar oder in Suspension wachsende, sterile Wurzeln 

Merkmale

• Verdopplungszeit von 1 bis 8 d
• hoher Verzweigungsgrad
• hohe Konzentrationen von Wirkstoffen
• Langzeitstabile Wirkstoffproduktion (genetisch/biochemisch)
• benötigen nur einfache Nährmedien ohne Phytohormone

1. Sterilisation 
2. Infektion eines Blatt- oder Stengel-explantats mit A. rhizogenes Stämmen (Ri-Plasmid wird übertragen und in Pflanzengenom integriert)
3. Entwicklung eines Wurzelsystems an der Infektionsseite bei Kultivierung auf Agar-Platten 

Wirtschaftlich

• Ablehnende Haltung zur Nutzung für kosmetische Produkte 

Kulturell

• Morphologischer Charakter (hohe Gewebeintegrität) kompliziert ihre in vitro Kultivierung 

• Differenzierte Organkultur
• Somatische Embryonen 
  • direkte Embryogenese (aus Zelle oder Gewebe)
  • indirekte Embryogenese (vorausgehende Kallusbildung)

• Zellen ohne Zellwand
• Ausgangsbasis für Regeneration über Stufen Kallus, Sprossbildung, Wurzelbildung und Pflanze
• Ausgangspunkt für Transformation pflanzlicher Zellen