Molekularbiologie
Übungen zur MolBio Vorlesung von Prof. Gorkosch
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Flashcards
Aus welchen bestandteilen bestehen jeweils DNA und RNA?
DNA besteht aus Zucker, Desoxyribose und Phosphat.
Die Basen sind Adenin, Thymin, Guanin und Cytosin.
RNA besteht aus Zucker, Ribose und Phosphat.
Die Basen sind Adenin, Uracil, Guanin und Cytosin.
Was bedeuten die Abkürzungen DNA und RNA?
DNA: Deoxyribonucleic acid
RNA: Ribonucleic acid
Was ist der Unterschied ziwschen Nukleotid und Nukleosid?
Nukleotid = Zucker+Base+Phosphat
Nukleosid = Zucker+Base
Welche Basen sind die die Purine, und welche die Pyrimidine?
Purine: Adenin, Guanin
Pyrimidine: Cytosin, Thymin, Uracil
Was bewirken die Wasserstoffbrücken zwischen den Basen der DNA?
Die Wasserstoffbrücken bewirkendas Ausbilden eines DNA Doppelstranges.
Welche Basen der DNA paaren über wie viele Wasserstoffbrücken?
A und T paaren mit 2 H-Brücken.
C und G paaren mit 3 H-Brücken.
Warum ist die Helix in der Natur so beliebt?
Lange Moleküle können so am platzsparensten untergebracht werden. Die Helix erlaubt Zugang von allen Seiten, so dass die DNA von allen Seiten abgelesen werden kann.
Was bedeutet genetischer-Code?
Die Basen der DNA haben eine bestimmte Abfolge = Sequenz. Diese Sequenz wird als Buchstabenfolge mit Orientierung angegeben.:
Oberer Strang 5'-Sequenz-3'
Unterer Strang 3'-Sequenz-5'
Die Basen des oberen und des unteren Stranges sind komplementär.
Wie funktioniert der Genetische Code?
Die Basensequenz der DNA bzw. mRNA wird übersetzt bzw. translatiert. 3 Basen (=Triplet) codieren für eine AS. Die Abfolge der AS entspricht dann der Primärstruktur der gebildeten Proteine.
Nennen sie die Unterschiede zwischen Pro- und Eukariontischer DNA
Prokarionten
Meist Ringförmig,
1-50 pro Zelle
Replikation an Zellzyklus gebunden
DNA ist Nackt
An der inneren Zellmembran befestigt.
Einige Prokarionten Enthalten zusätzliche Informationen auf Plasmiden
Eukarionten
Lineare DNA Stränge
Mehrere Stränge (Chromosomen), meist diploid oder polyploid.
Ungerade Anzahl Anzahl ausser 1 führen meist zu Infertilität
DNA ist nicht nackt sondern ist aufgewickelt auf Histone, und bilden Nuclesome
DNA ist in Zellkern.
Was ist der Unterschied zwischen Transkription mit anschliessender Translation und Replikation.
Replikation dient der Verdopplung des genetischen Materials.
Transkription und Translation dienen der Expression von Genen.
Wann ist das genetische Material, die Chromosomen kondensiert?
In der Metaphase der Mitose bzw. Meiose.
Wieviele Chromosomen hat diploides humanes Genom?
46
Wie heißen die Chromosomen, die für das Geschlecht beim Menschen die Gene Tragen?
Gonosomen
Was ist das Centromer?
Chromatidenverbindung, Angriffspunkt für Spindelapparat, hochrepetitive Sequenz.
Was sind Telomere:
Enden der DNA-Stränge aus vielen repetitiven Sequenzen(Beim Menschen AGGGTT), Seqeunz kann bis mehrere 1000male vorliegen und Endet in einem Einzelstrang.
Was ist der Stem-loop?
Sekundärstruktur, die durch sogenannte invertet repeats(=Palindrome) entsteht. Die komplementären Sequenzen lagern sich aneinander und bilden Schleifen. Dient der Termination der Transkription.
Was bedeutet Supercoil?
Abweichen der normalen Anzahl an bp pro Umgang(normal 10,4 bp). Über- bzw. Unterspiralisierung. Entsteht durch Topoisomerasen(in Bakterien) oder Bindung an Proteine(Eukarionten). Dient der Regulation der Replikation und Transkription.
Was hat der Zellzyklus mit der Replikation zu tun?
Die Replikation ist nur teilweise an den Zellzyklus gebunden. Vor dder Zellteilung muss das genetische Material verdoppelt werden. Die Replikation findet in der S-Phase des Zellzyklus statt. Bei Einzellern führt der Zellzyklus und die Zellteilung zur Reproduktion. Bei Vielzellern nicht.
Wie lauten die verschiedenen Phasen des Zellzyklus?
M, G1, S, G2
Welchen Sinn haben Kontrollpunkte, im Zellzyklus?
Sie können den Zellzyklus verlangsamen bzw. Anhalten, z.B. für Reparaturen der DNA
Was ist Horizontaler Gentransfer?
Horizontaler Gentransfer geschieht über Pili, ist nicht vererbt, also nicht von Mutter- auf Tochtergeneration.
Was sind CdK? Wer kontroliert sie?
CdK = cyclin dependant Kinasen (0Proteinkinasen).
Sie phosphorylierenintrazelluläre Proteine, die am Anschalten und der Steuerung wesentlicher Zellzyklusvorgänge beteiligt sind.
Reguliert werden CdK durch CdK-Regulatoren, wie Cycline durch Komplexbildung
Welche Enzyme sind an der Entwindung der DNA beteiligt?
Helicase: Entwindung und trennung der Stränge
Topoisomerase: Entwindung überspiralisierter Bereiche Typ I (Topoisomerasen i und III) und Typ ii (Gyrasen und Topoisomerase IV)
Was macht die Gyrase?
Sie sorgt durch negatives Supercoiling für eine Entwindung der DNA.
Was ist Catenan? Wie kann es zur Bildung dieser Struktur kommen?
Verknüpfung 2er DNA Ringe, die bei der Replikation des ringförmigen Bakteriengenoms entstehen können.
Warum wird ein RNA-Primer verwendetund kein DNA-Primer , den man ja einfach dran lassen könnte und nicht wieder ablösen müsste?
DNA-Polymerase kann keine Ketten de novo anfangen, aber die RNA-Polymerase(Primase) kann das. Dafür ist die DNA-Polymerase selbstkorrigierend, die Primase nicht(relativ ungenau, mind. 1:105 Fehler). Extrem hohe Mutationsrate wäre die Folge, daher der Umweg über die RNA-Primer.
Welche Primer werden bei der PCR verwendet?
Beid er PCR werden DNA-Primer verwendet, da diese eh syntetisch sind und ansonsten an jedem Strang am Ende ein RNA-Stück wäre.
Warum ist das nicht so schlimm, wenn die RNA-Polymerase relativ fehlerbehaftet arbeitet?
Wegen der Korrekturmechanismen, die eingebauten RNA-Primer werden eh von der DNA-Polymerase wieder abgebaut (=Nucleaseaktivität)
Was ist die Korrektur-Exonuklease-Aktivität?
Die DNA-Polymerase kann nur an richtig basengepaarten 3'-OH-Gruppen anbauen. Sie erkennt falsch gepaarte Basen und baut diese so lange ab, bis sie auf ein richtig gebundenes bp stößt. (Nucleasenaktivität). Erst wenn sie ein richtig gepaartes 3'-OH findet, fängt sie an den neuen Strang zu synthetisieren (=Polymeraseaktivität)
Ein durchschnittliches Chromosom des Menschen besteht aus einem einzigen linearen DNA-Molekül mit etwa 150 Millionen Nukleotidpaaren. Etwa 50 Nukleotide pro Sekunde werden rpliziert. Es würde ca. 800 h dauern, wenn alle Chromosomen gleichzeitig repliziert würden. Die S-Phase dauert aber nur ca. 40 min. Wie ist das möglich?
Es gibt mehrere ORIs und ORCs, die Replikation fängt an mehreren Stellen gleichzeitig an und die Replikationsgabeln laufen aufainander zu.
Wie heißt das Enzym das "Enden" bei linearen Chromosomen verlängern kann?
Telomerase
Wie funktioniert die Telomerase?
Am Ende des Chromosoms befinden sich einzelstränge DNA-Stücke = Telomere. Die Telomerase enthält ein kleines Stück einzelsträngige RNA, was an dem einzelsträngigen Telomer anlagern kann. Die Telomerase synthetisirt nun komplementär zu ihrem RNA-Stück neue DNA, sodass die Primase dort neue Primer anlagern kann und der Rest des Folge-Strangs in 5'-3'-Richtung von der DNA-Polymerase synthetisiert werden kann.
Was ist der ORC?
Ursprungserkennungskomplex bzw. origin of recognition complex
Wieviele ORCs gibt es?
Eine ORC-Art, 1 ORC pro ORI, 1 ORC pro Replikationsgabel ???
Wozu ist der ORC gut?
Der ORC erkennt ORI-Sequenzen auf DNA und kann daran binden. Durch die bindung ermöglicht er anderen Proteinen die Anlagerung was wiederum zur Anlagerung der Polymerase führt. Die Replikation kann dann starten.
DNA wird in RNA umgeschreiben (welche art?) Wie nennt man den Vorgang?
Prä-m-RNA, Transkription
Was geschieht nachdem prä-m-RNA gebildet wurde?
Processing: Umwandlung von prä-m-RNA in m-RNA
Translation: Proteinbiosynthese
Aus welchem Untereinheiten ist die bakterielle RNA-Polymerase zusammengesetzt?
Core Enzym + SigmaFaktor Holoenzym
Das Core Enzym besteht aus 5 UE (alpha2, beta, beta', omega)
Was sind Konsensus Sequenzen?
Die DNA-Sequenzen des Promotors in allen Organismen weist eine geringe Variabilität auf, das heisst, dass sie sich im Verlauf der Evolution nur wenig verändert hat. Sie ist also konserviert. Die Konsensus-Sequenz ist de Durchschnitts Promotorsequenz. Bei Prokayonten gibt es 2 typische Promotorsequenzen, die Pribnow-Box mit der Konsensussequenz TATAAT. Sie liegt 10 bp vor dem Transkriptionsstartpunkt (oftmals Bezeichnung mit +1). Die zweite Konsensussequenz TTGACA liegt 35 bp vor dem Start.
Schreibweisen: (-10)-Box: 5'-TATAAT-3' und (-35)-Box: 5'-TTGACA-3'. Bei den Eukaryonten gibt es 3 unterschiedliche RNA-Polymerasen, die an verschiedenen Promotorsequenzen binden. Eine typische Konsensussequenz für die RNA-Polimerase II ist die TATA-Box. Sie befindet sich 25-30 bp vor dem Transkriptionsstartpunkt. Schreibweisen : (-10)-Box: 5'-TATAAT-3' und (-35)-Box: 5'-TTGACA-3'