Histologie

von der Peripherie zum Perikaryon

vom Perikaryon zum Muskel

Erregung springt über Schann'sche Zellen weiter

ein Fortsatz

zwei Fortsätze

kein Dendrit, dafür zwei Axome

Zellsammlung in der Peripherie

- im Gehirn ca. 7% -> Nervenzellen:Gliazellen = 1:10

- Tumoren im Nervensystem (Gehirntumor): Gliazellen, weil Nervenzellen nicht teilungsfähig sind -> Gliazellen haben Teilungsfähigkeit behalten

- können Form verändern

- viele Zwischenräume (Gliasubstanz zwischen Nervenzellen): Neurophil

- Spalten zwischen Gliazellen und Ganglienzellen: ca. 20 nm

- umhüllen Axon

- dienen der Reizweiterleitung

- bilden im peripheren Nervensystem die Markscheide

- auch Amphizyten

- Kranz von Zellen um Nervenzellen

- bilden eine oder mehrere Zellschichten um Perykaryon

- Stützzellen im Bereich der Sinnesorgane

- Schwann'sche Zellen

- Mantelzellen

- Lemnozyten

- Astrozyten

- Oligodendrozyten

- Mikroglia

- Ependymozyten

- Tanyzyten

- Plexusepithelzellen

- Pituizyten

- auch Makroglia (größte Gliazellen)

- lange Fortsätze

- Ernährungsfunktion -> enge Beziehung zu Kapillaren

- Gliamembran an Gefäßen -> beteiligt an Membrana limitans gliae vascularis

- im Breich von Synapsen: Schutz

- unter äußerer Oberfläche von Rückenmark und Gehirn -> beteiligt an Membranan limitans gliae superficialis (Schutzfunktion)

- große Bedeutung für Narbenbildung

- Mutterzelle von Oligozyten

im Gehirn:

- kontrollieren extrazelluläres Milieu (Diffusionsbarriere)

- kontrollieren Elektrolythaushalt

- Abstammung von Astrozyten

- Myelinbildner im ZNS

- auch Mesoglia oder Hortega-Glia

- bindegewebige Herkunft (mesodermal -> die anderen: ektodermal)

- sowohl in weißer, als auch grauer Substanz

- umgewandelte Makrophagen (Fresszellen) -> beseitigt abgestorbene Gehirnzellen

- kleide Hohlräume aus (Gehirn: bilateral symmetrischer Hohlaurm)

- besitzen Mmikrovillie -> sind stoffwechselaktiv

- Bewegung der Gehirnflüssigkeit mittels Kinozilien

- besonders im Bereich des 3. Ventrikels

- eigene Zellart mit sehr langen Fortsätzen zu Gefäßen hin -> Sonderform der Glia

- produzieren Liquor

- Mikrovilli und Kinozilien sind vorhanden

- sitzen kapillarreichem Gewebe auf -> Plexus choroideus

- in Hypophysenhinterlappen (Erzeugung und Steuerung der Hormone im Vorderlappen) - befinden sich genau hinter Nase

- reines Nervengewebe (Axone) -> Abgabe von Hormonen (Vasopressin, Oxytocin)

1. Ausstrichpräparat: Blut

2. Isolations-, Zupfpräparat: mit Nadel wird ein Präparat zerzupft, sodass es ganz dünn oder chemisch zersetzt wird

3. Häutchenpräparat: dünne, durchstrahlbare Häutchen

4. Schnittpräparat: dünn geschnittene Scheiben eines Präparates (am häufigsten verwendet)

Durch Fixations-/Färbungsvorgänge;

1. um Autolyse und Fäulnis zu verhindern

2. um die Festigkeit zu erhöhen -> Härtung

3. die Färbbarkeit zu erhöhen

1. Entnahme des Gewebes

2. Fixierung des Präparates

3. Einbettung der Probe

4. Dünne Schnitte anfertigen

5. Schnitt auf Objektträger legen, strecken

6. Färbung

7. Deckglas auf gefärbtes Präparat geben

entweder durch Biopsie oder direkt aus der Leiche,

sollte möglichst klein sein (1,5 x 1,5 x 1,5) -> Fixation geht schneller

Präparat liefert immer nur Momentaufnahmen

die meisten Präparate werden durch eine Mischung fixiert,

Proben werden durch die Manipulation mit den Fixierungsmitteln bis zu 30% kleiner,

sie können nicht mit lebenden Zellen verglichen werden

-> weil aber alle gleich behandelt werden können diese sehr wohl verglichen werden!

1. Immersionsfixierung: Gewebeprobe in Fixierungsmittel einlegen und warten, bis Flüssigkeit die Probe durchzogen hat (durch Bewegung beschleunigt)

2. Perfusionsfixierung: funktioniert über das Kapillarsystem der Probe -> ist schneller aber aufwendiger

3. Fixierung durch verschiedene Stoffe: Aldehyde, Alkohole, organische Säuren, Schwermetallsalze

(bewirken Gelatbildung)

Formaldehyd: gasförmig, wird zu 38-40% in Wasser gelöst, wird 4-10%ig in der Histologie verwendet -> verdünnt Pufferlösung oder Leitungswasser;

Formalin = nicht das beste Mittel, zerstört aber am wenigsten;

Glutardialdehyd (Elektronenmikroskop)

(Wasserentzug)

1. Methanol (selten verwendet, da sehr giftig)

2. Ethanol (teuer, kann wegen Verdunstung nur 98%ig verwendeet werden)

3. Isopropanol (geht 100%ig in Lösung, ist nicht teuer)

(werden immer verdünnt verwendet, ansonsten wird etwas zerstört)

1. Essigsäure: CH3COOH fixiert durch Verschiebung des pH-Wertes -> Denaturierung

2. Pikrinsäure (auch Sprengmittel)

Probe wird meist in Paraffin, aber auch Kunststoff oder Celloidin gebettet:

1. Auswaschung mit Wasser, um Fixierungsmittel zu entfernen

2. Wasserentzug mit aufsteigender Alkoholreihe

3. Alkoholentzug mit Methylbenzoat -> entzieht auch Restwasser

4. Menthylbenzoat mit Chlorophorm (früher Benzol, aber giftig)

5. Präparat wird in Paraffin gegeben (Chlorophorm löst sich darin)

6. Präparat wird in Paraffinschälchen in den Paraffinofen gegeben

7. Präparat wird in eine Form gegeben und mit Paraffin übergossen (schöne Seite nach unten) 

Schnittblock wird in Schlittenmikroskop gegeben, dieses fertigt dünne Schnitte an:

- 7 - 10 µm für das Lichtmikroskop (LIMI)

- 0,5 - 1 µm dicke Präparate werden als semidünne Schnitte bezeichnet

- 30 - 100 nm sind ultradünne Schnitte für das Elektronenmikroskop (EMS)

- mit Hilfe eines nassen Pinsels

- Schnitt muss erst gestaucht und gestreckt werden: Eiweisglyzerin auf Objektträger, Wasser auf Eiweis -> Streckung bei 40°C (24h im Wärmeschrank bis Eiweis fest koaguliert ist

- Paraffinreste werden mit Xylol entfertn

- Xylol wird dann mit absteigender konzentrierter Alkoholreihe entfernt

- wird mit Eindickmedium mit gleichem Brechungsindex wie Glas versiegelt

-> früher wurde Kanadabalsam verwendet, heute Kunststoffe (Entellan oder Eukitt)

-> Ergebnis: planparallele Platte mit histologischem Präparat

H ... Hämatoxilin (Präparat wird Rot -> unter Leitungswasser gehlaten wird es blau -> gebläut

E ... Eosin (Präparat wird in eine aufsteigende Alkoholreihe gegeben -> Wasserreste entfernen)

- Sukzessivfärbung: mit einer Farbe

- Simultanfärubng: mehrere Farben

panoptische Färbung (Pappenheim - Färbung) -> Simultan-Sukzessiv-Färbung:

1. May - Grünwald - Färbung (Methylenblau, Eosin)

2. Auswaschung

3. Giemsa - Färbung (Methylenblau, Eosin, Azur)

Azanfärbung: Azokarmin (rot) und Anilinblau -> kollagene Fasern werden blau

- wird verwendet wenn schnelles Untersuchungsergebnis gebraucht wird (Tumoroperation)

- Probe wird zum Teil in Paraffin gegeben, zum Teil eingefroren -> Präparat kann zerschnitten werden

- durch Kristallbildung können Zellen zerstört werden, wie bei Fixierungsmitteln viel verändert wird (Fettauflösung durch Alkohol)

- nach Schnellfärbung kann Präparat betrachtet werden

- weitere Möglichkeit: Gefriertrocknung: Wasserentzug im getrockneten Zustand