Biopharmazeutika
Grundlagen Gentechnik, Herstellung Proteinwirkstoffe
Grundlagen Gentechnik, Herstellung Proteinwirkstoffe
Durch welche Polymorphismen wird das Blutungsrisiko bei Therapie mit Vitamin-K-Antagonisten erhöht? Mechanismus!
mehrere relevante Polymorphismen:
1. CYP2C9
2.Vitamin-K-Epoxid-Reduktase-Komplex (KVORC1)
3.CYP4F2
Durch welches CYP-Enzym wird Clopidogrel, was zur Reinfarktprophylaxe angewendet wird, metabolisiert?
CYP2C19, bei Polymorphismus langsame/wenig Bidlung des aktiven Metaboliten
Durch welches Enzym wird 6-Mercaptopurin metabolisiert?
Thiopurin-S-Methyltransferase (TPMT) -> bei Polymorphismus kein Abbau in das unwirksame S-Methylmercaptopurin
Vemurafenib: AS gegen was? Wie wirkt es? (nicht so wichtig)
1. Darreichungsform: Filmtablette
2. Indikation: Monotherapie zur Behandlung von erwachsenen Patienten mit BRAF-
V600-Mutation-positivem nicht resezierbarem oder metastasiertem Melanom
3. IC50 Anti-Zellproliferation 0,016-1,131 µM (BRAF-V600) vs. 12,06-14,32 µM (BRAF)
Welche Mutation tritt bei vielen Melanomen auf?
BRAF Mutation -> BRAF V 600
Gegen was ist Ivacaftor ein Medikament?
Mukoviszidose
Luciferase
Reportergen, oxidative Enzyme, die Biolumineszenz produzieren -> Luciferine (Naturstoffe, die zur Erzeugung von Licht durch Biolumineszenz genutzt werden) mit Sauerstoff, ATP o. Magnesium -> Reaktion zu Oxoluciferin -> Zerfall -> Biolumineszenz, haben meist pH-Optimum bei 6,3
Reportergen
Gen, mit dem bestimmte Effekte/ Qualitäten anderer Gene gezeigt werden können
GFP
Grün-fluoreszierendes Protein: hat kein Chromophor als prosthetische Gruppe, bildet sich erst durch Umlagerung von AS in Position 65-67 bei UV-Anregung -> erst Ausbildung eines 5er Rings, dann Dehydratisierung, dann Oxidation mit Luftsauerstoff
Luciferase-Reportergen-Assay
benötigt Promotor, Luciferase Gen, Luciferin
Jacob-Monod-Modell der bakteriellen Genregulation
Operon mit Promotor, dass indirekt durch Repressor kontrolliert wird reguliert Proteinproduktion -> erst Wachstum der Kultur, dann Aufheben der Inhibition des Repressors -> Proteinproduktion
IPTG
Isopropyl-beta-D-thiogalactosid, künstliches Galactose-Derivat, dass als lac-Operon Induktor genutzt wird -> bindet an Repressor LacI, wodurch dessen inhibitorischer effekt durch Konformationsänderung aufgehoben wird -> Proteinproduktion
kann IPTG nicht durch Galactosidase gespalten werden
Bakterielle Wachstumskurve
lag: Anpassen an Kulturmedium
log: exponentielle Wachstumsphase
stationär: Sterben & Wachstum in GG, Kämpfen um Ressourcen
Multiplex-STR-Analyse
3% des humanen Genoms bestehen aus simple sequence repeats (SSR) aus sich wiederholenden Neukleotidsequenzen unterschiedlicher Länge (nichtkodierend -> kein Selektionsdruck) -> Länge der SSR = Maß der Individualität -> Unterteilung in Mini & Microsatelliten ->
Mikro: 100-400 bp lang, auch short tandem repeats (STR) genannt -> werden zur DNA-Typisierung, jedes Primer-Paar amplifiziert nur einen STR-Locus, Einsatz mehrerer Primer = mehrere STR-Loci werden erfasst -> Ergebnis: PCR-Fragmente unterschiedlicher Größe -> Trennung durch Elektrophorese => "Fingerabdruck"
Operon
Einheit von Genen, deren Genexpression gemeinsam reguliert wird (meistens bei Prokaryoten)
z.B. lac-Operon: werden gemeinsam auf derselben RNA translatiert (polycistronische RNA), Kontrolle der Expression durch Repressor, wenn der Metabolit, der von den Genprodukten eines Operons verstoffwechselt wird vorhanden, wird die Expression automatisch verstärkt
MCS
Multiple cloning region -> künstlich, viele Palindrome auf engem Raum
PCR
Polymerasekettenreaktion
benötigte Materialien: hitzestabile DNA-Polymerase (meist Taq-Polymerase), Mg2+(Cofaktor DNA-Polymerase), Primer, dNTPs (Desoxy-Nukleotide), template DNA, Puffer
95°C: Denaturierung -> Trennen in Einzelstränge
58°C: Annealing der Primer
75°C: DNA Synthese
"klassisches Reportergen" beta-Galactosidase
Blau-Weiß-Selektion
weiß: cDNA wahrscheinlich aufgenommen, da Galactosidase nicht funktionsfähig ist keine Blaufärbung
blau: Galactosidase intakt, X-Gal wird zu XY-Indigo gespalten -> Blaufärbung
Messung Estrogen-Rezeptor Aktivität mit Luciferase messen
Überprüfen, ob Substanz Estrogen-Rezeptor Agonist ist:
Falls Stoff an Estrogen-Rezeptor bindet, dann dissoziieren HSP ab, Dimerisierung, Wanderung in Zelle, aktivieren des Promotors durch beta-Estrogenrezeptor -> Luciferasegen wird exprimiert -> Luciferin, ATP & O2 zu Oxoluciferin katalysiert, was instabil ist, dann Lichtemission => Bestätigung, dass Agonist ist
FRET
Fluorescence resonance energy transfer -> strahlungsfreie Übertragung von Energie von energireichen, angeregten Farbstoff (Donor) auf zweiten Farbstoff, der dadurch zum Leuchten gebracht wird
Biopharmazeutika Definition
Arzneistoffe, die mithilfe gentechnisch veränderter Organismen hergestellt werden.
Dabei wird die für das benötigte Produkt kodierende DNA in eine geeignete Zelle eingeführt, in der diese DNA exprimiert und translatiert wird (Ph.Eur. Monographie "DNA-rekombinationstechnisch hergestellte Produkte")
Vergleich von chemisch-synthetisch hergestellen AS und Biopharmazeutika
Biotechnologie Definition
• (Industrieller) Prozess zur Produktion biologischer Materialien und Agentien durch die Ausnutzung und Optimierung natürlicherweise vorhandener Syntheseleistungen von Zellen
• gezielte Optimierung von Produktionsleistungen durch Veränderung der DNA durch gezielte Selektion und/oder ungerichtete Mutagenese durch Chemikalien, ultraviolette Strahlung oder durch ionisierende Strahlung
Beispiele für biotechnologisch hergestellte Produkte
monoklonale AK, rekombinante Proteine, Blutprodukte, Sera, Impfstoffe
Gentechnik Definition
ist eine Methodensammlung, die es erlaubt, aus einem Organismus DNA zu isolieren (Spender), neu zu kombinieren, in einen anderen Organismus einzubringen (Empfänger) und dort zur Wirkung zu bringen.
Was ist Transgenesis?
Das einbringen einer artfremden DNA
Welche Faustregel gilt bezüglich des Erfolges einer Klonation und der Größe der DNA?
Je kleiner die DNA, desto besser ist sie zu klonieren!
Herstellung DNA-rekombinatorischer Produkte laut Ph.Eur.
DNA-rekombinatorisch hergestellte Produkte werden durch genetische Modifikation hergestellt, bei der die für das benötigte Produkt kodierende DNA gewöhnlich mit Hilfe eines Plasmids oder viralen Vektors in einen geeigneten Mikroorganismus oder eine geeignete Zellinie eingeführt wird, in denen diese DNA exprimiert und translatiert wird. Das gewünschte Produkt wird dann durch Extraktion und Reinigung gewonnen. Die vor der Aufnahme des Vektors vorliegende Zelle oder der Mikroorganismus wird als Wirtszelle bezeichnet, die im Herstellungsprozess
verwendete stabile Verbindung der beiden als Wirt-Vektor-System
Was muss mit z.B. humaner DNA erst vorgenommen werden, bevor es in eine bakterielle Zelle eingeschleust werden kann?
Introns müssen rausgespliced werden, weil Bakterien keine Introns haben und damit nichts anfangen können
Wie wird die zu rekombinierende DNA aus dem Genom des jeweiligen Organismus rausgelöst, um dann mit einem geeigneten Promotor kombiniert werden zu können?
• PCR zum Isolieren der cDNA
• Schneiden von cDNA an spezifischen Stellen mit Restriktionsendonukleasen
• Ligation der cDNA in ein geeignetes Plasmid
• Amplifizieren erfolgreicher Ligation in Bakterienzellen
Restriktions-Endonukleasen und deren Aufgabe im Labor-Jargon
Restriktionsenzyme , Schnitte an bestimmten Stellen der DNA machen => verdauen
Welche Voraussetzung bezüglich der Enden von DNAs muss erfüllt sein, damit diese miteinander rekombiniert werden können?
sie müssen zusammenpassen
Wodurch kann DNA unspezifisch fragmentiert werden?
Durch Ultraschallbad
Restriktionsenzyme Funktion
- schneiden DNA an bestimmter Stelle (ausschließlich Doppelstrang DNA!) palindromisch => öffnen hierbei das Ribosephosphat-Rückgrat der DNA => Alle Bruchstrücke sehen dann gleich aus => verschiedene DNA-Moleküle (auch wenn sie aus verschiedenen
Organismen stammen!), die mit dem gleichen Restriktionsenzym geschnitten wurden, können wieder zusammengefügt – also rekombiniert – werden
siehe Bild: Einzelstrangbruch
DNA-Ligasen Funktion
verbinden DNA-Moleküle
Was versteht man unter einer Ligation?
Das Zusammenfügen zweier DNA-Fragmente (schließen einer Phosphodiesterbindung)
Vorteile und Nachteile von E. Coli als Klonier-Bakterium und als Wirtszelle zur Proteinherstellung
Vorteile:
• repliziert Plasmide natürlicherweise
• nicht pathogen, nicht mit Humanpathogenen infizierbar (z.B. viren)
• Genom komplett bekannt
• umfangreiche Erfahrung der Genetik
• nimmt leicht DNA auf
• schnelles Wachstum
• einfache Handhabung
• kostengünstige Medien
• Proteinproduktion leicht steuerbar
• hohe Proteinausbeuten
• einfaches Upscaling
• GRAS-Status (genetically recognized as safe): Wenn ein Organismus nicht auf dieser Liste ist, werden riesen Dossiers zur Zulassung benötigt, die die Sicherheit belegen
Nachteile:
• keine posttranslationalen Modifikationen
• Proteine oft nicht in der korrekten Tertiärstruktur
• Proteine oft denaturiert ("Inclusion bodies")
• Freisetzung von Pyrogenen => LPS aus Zellwand, gram -
• kaum Selektion von Proteinen
• Proteine, die N-Glykosilierungen oder andere posttranslationale Modifikationen für ihre Funktionalität benötigen können nicht in Bakterien hergestellt werden
Was ist ori?
origin of replication => Replikationsursprung, an dem die Zelle erkennt, dass es sich um eine replizierbare, aber extrachromosomale DNA handelt.
Wozu dienen Plasmide bei Bakterien?
zum horizontalen Gentransfer über Konjugation
Transformation von Bakterien
Methode, um fremde DNA in den Organismus zu bringen
andere Methode: mittels Elektroporation, erst 0°C, dann Feldstärke von 10-14 kV/cm anlegen mittels Kondensator => Strom durch die Zelle macht die Membran löchrig => Plasmidaufnahme => Ausbringen auf Selektionsagar
Auf dem Selektionsagar überleben nur die Zellen, die die Plasmide aufgenommen haben. Hierbei können sowohl leere Plasmide als auch solche mit der gewünschten rekombinierten DNA vorhanden
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Cartes-fiches
Gentherapie Prinzip, viral
Was ist SCID?
Schwere kombinierte Immundefizienz
Was ist ADA?
Verlust der Adenosin-Deaminase
ADA-SCID: Was ist das, welche Therapiemöglichkeiten gibt es?
• Verlust der Adenosin-Deaminase (ADA)
• autosomal-rezessiv vererbt
• Therapie-Optionen:
o Enzymersatztherapie: bovine PEG-ADA (Pegademase)
o Stammzelltransplantation
o Gentherapie
X-SCID: Was ist das, welche Therapiemöglichkeiten gibt es?
• Verlust der gemeinsamen Untereinheit (γ) verschiedener Interleukin-Rezeptoren
(IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15, IL-21)
• X-chromosomal vererbt
• Therapie-Optionen:
o Stammzelltransplantation
o Gentherapie
Herstellung von Gentransfer-Vektoren
Transduktion
Genübertragung mittels Bakteriophagen/Viren
Transduktion therapeutischen Gens in Patientenzelle
wird in vitro durchgeführt nach Entnahme von Zellen des Patienten
Retroviren als Gen-Transfersysteme
• Gentransfersysteme bestehen aus replikationsinkompetenten Viren
• Vorteile:
o effiziente Transduktion
o oft lang anhaltende Expression des Fremdgens
o Viren selbst sind kaum immunogen
• Nachteile:
o moderate Virustiter (106-107/ml)
o Gengrößen beschränkt auf 8-10 kb
o infizieren nur proliferierende Zellen
o nicht zelltypspezifisch
o meist nur Ex-vivo-Applikation möglich
o (Gefahr der Rekombination mit Endogenen Retroviren)
o Insertionspräferenz in Genen => Genotoxizität
Lentivirale (HIV-basierte) Gentransfer- Systeme: Vorteile und Nachteile
• Lentivirale Gentransfersysteme bestehen aus replikationsinkompetenten
Viren, basierend auf dem HIV-Genom
• Vorteile:
o sehr effiziente Tranduktion
o infizieren proliferierende Zellen und nicht-prolifierierende Zellen
o oft lang anhaltende Expression des Fremdgens
• Nachteile:
o moderate Virustiter (106-107/ml)
o nicht zelltypspezifisch
o nur Ex-vivo-Applikation
o Insertionspräferenz in Genen =>Genotoxizität
o spezifisch für CD4+-Zellen (=> "Pseudotyping" mit VSV-G ENV-Gen)
Was versteht man unter AAV?
Adenoassoziierte Viren
Was ist ITR?
Inverted terminal repeats, wichtig für Replikation bei Gentherapie-Vektoren
Adenovirale Gentransfersysteme: Eigenschaften Adenoviren, Vort und Nachteile
• komplexe Doppelstrang-DNA-Viren
• verursachen Erkrankungen der Atemwege, des Gastrointestinaltraktes, anderer
innerer Organe, und der Bindehaut des Auges
• Gentransfersysteme bestehen aus replikationsinkompetenten Viren
• Vorteile:
o hohe Transduktionsfrequenz
o sehr hohe Virustiter (1011-1012/ml)
o infizieren auch nicht proliferierende Zellen
o können große Gene übertragen (≤36 kb)
o Ex-vivo- und In-vivo-Applikation möglich
- wenig antigen
• Nachteile:
o breiter Tropismus (bezeichnet in der Virologie die Fähigkeit eines Virus, eine bestimmte Sorte von Zellen oder bestimmte Gewebe zu infizieren und sich dort zu vermehren)
o keine Integration, nicht genotoxisch
o zeitlich begrenzte Expression
o stark immunogen
- nur kleine Gene transportierbar <4,5 kbp
- kein Integrationsspezifität in Abwesenheit von REP
Was sind onkolytische Viren? Beispiele
Onkolytische Viren sind Viren, die direkt oder indirekt Tumorzellen töten. Onkolytische Viren besitzen verschiedene Wirkungsmechanismen, z. B. indem Sie Tumorzellen infizieren und lysieren, eine Immunantwort erzeugen oder Toxine und Tumorsuppressorgene in Tumorzellen einführen.
Coxsackieviren, Adenoviren, Vacciniaviren
Gentherapie-Vektoren mit Adenoassoziierten Viren
• nicht humanpathogene Parvoviren mit Einzelstrang-DNA-Genom
• spezifische Integration in Chromosom 19q13.4 (REP-abhängig)
• Gentransfersysteme bestehen aus replikationsinkompetenten Viren
• Vorteile:
o hohe Transduktionsfrequenz
o hohe Virustiter (<1010/ml); In-vivo-Applikation möglich
o geringes antigenes Potenzial
o infizieren auch nicht proliferierende Zellen
o bleiben längere Zeit episomal (Integration selten) ( Episome sind bei Bakterien Plasmide, die sich in die chromosomale DNA des Wirtsorganismus integrieren können)
• Nachteile:
o z.T. präexistierende neutralisierende Antikörper in Patienten
o nur kleine Gene transportierbar (<4.5 kb)
o zeitlich begrenzte Expression des Transgens
o keine Integrationsspezifität in Abwesenheit des REP-Proteins
(Insertionspräferenz in Genen)
Kreislauf der Lipoproteine
Was ist LPLD?
Lipoproteinlipase-Defizienz
• autosomal-rezessiv, sehr selten (1-2 pro 1 Million)
• mehr als 70 Mutationen bekannt, die meisten inaktivieren das Enzym
• manifestiert sich im Kindesalter
• klinisch: Hypertriglyceridämie(10-100x so viel wie normal) und Chylomikronämie; starke Unterleibsschmerzen, Gedeihstörungen, je nach Schwere der Krankheit bis zu 360-fach erhöhtes Risiko für akute Pankreatitis
• Pankreatitis-Risiko in der Praxis auch durch strenge fettarme Diät nicht gut kontrollierbar
• keine Therapie mit Biopharmazeutikum möglich, weil das Enzym eine extrem kurze Halbwertszeit hat (=> durch PEGylierung nicht verlängerbar
• LPL wird von Endothelzellen, Muskelzellen und Fettzellen gebildet.
• in den Gefäßen ist LPL an die Außenseite von Endothelzellen gebunden
• gutes Modell für Gentherapie
o weil Protein dann dauerhaft gebildet wird
o relativ geringe Level verringern Chylomikronen nachhaltig
o LPL wird in Muskelzellen natürlicherweise gebildet
Wie heißt das erste zugelassene Gentherapeutikum in der EU?
Alipogentiparvovec (Glybera)
Was bedeuten die Silben "parvo" und "vec" bei Gentherapeutika?
Parvo: Parvovirus (AAV)
Vec: nicht-replizierender viraler Vektor
Alipogentiparvovec (Glybera): Eigenschaften, Herstellung, Indikation, Dosierung
• Wirkstoff: Alipogentiparvovec (AMT-011, AAV1-LPLS447X)
• replikationsinkompetentes Virus vom AAV1-Serotyp, AAV2-ITRs
• 1 Durchstechflasche enthält 1 mL mit 3x1012 Genomkopien (gc) des Vektors
• Dosierung 1x1012 gc/kg KG (12 Mio. Viruspartikel -> 70 kg -> 24 Vials -> 1 Behandlung 1,3 Mio. Euro
• Indikation: familiäre Lipoproteinlipase-Defizienz (LPLD) bei Patienten mitschweren und multiplen Pankreatitis-Schüben trotz fettarmer Diät
• Anwendung nur nach positivem Gentest auf LPLD und bei Patienten mit >5% LPL im Plasma
• Applikation intramuskulär -> wird nach Produktion in Blutbahn sekretiert
• zwischen 3 Tage bis 12 Wochen nach Behandlung wird eine immunsuppressive Therapie empfohlen (z.B. Ciclosporin 3 mg/kg/Tag)-> Antigenität in hohen Dosen zu beachten
• Zulassung "unter außergewöhnlichen Umständen"
siRNA-Wirkstoffe, Beispiel aus klinischer Entwicklung
kp man eher unwichtig
• PCSK9 = Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9
• 10-20% der Patienten mit Hypercholesterimämie sind intolerant für die Therapie mit Statinen
• PCSK9 reguliert die Dichte von LDL-Rezeptoren auf Hepatozyten, indem es an LDLR bindet und dessen Internalisierung und lysosomalen Abbau fördert
• Ratio: weniger PCSK9 -> mehr LDLR -> weniger LDL-Cholesterin im Plasma
• Wirkstoff ALN-PCS
o siRNA gegen mRNA von PCSK9 -> Knockdown -> weniger PCSK9
o formuliert in Lipid-Nanopartikeln
Was sind SNPs?
Single Nucleotide Polymorphisms, Ursache für interindividuelle Unterschiede im Ansprechen aufeine medikamentöse Behandlung
Was ist ADR?
Adverse Drug Reaction
Non-Responder: Beispiele für einige Medikamente
Prädiktive Diagnostik
Vorhersage der Wirksamkeit eines Arzneistoffs bzw. der Vorhersage des Nebenwirkungspotenzials eines Wirkstoffs
Was für Methoden gibt es zur Analyse genetischer Polymorphismen? Analyse von Einzelgenen:
• Diagnostik einzelner SNPs in einzelnen bekannten Genen, die bekanntermaßen
den Metabolisierungs-Phänotyp beeinflussen
• Methoden:
o PCR-Amplifikation von Genabschnitten
o DNA-Sequenzierung (Sanger-Sequenzierung)
o DNA-Microarrays
Was für Methoden gibt es zur Analyse genetischer Polymorphismen? Analyse auf Genomebene:
• systematische Auflistung möglichst vieler SNPs im menschlichen Genom
• Versuch der Zuordnung von SNPs zu Metabolisierungs-Phänotyp
o Genomweite Assoziationsstudien (GWAS)
• Methoden:
o "Next generation" bzw. "Hochdurchsatz" DNA-Sequenzierung
o DNA-Microarrays
DNA Microarray Prinzip
• der "Chip" besteht aus einer beschichteten Glasoberfläche, an die die DNA kovalent gebunden wird
• typische Flächen sind ca. 1x1 cm (1 cm2)
• dort haben bis zu 300.000 verschiedene DNA-Sonden Platz
• Synthese von DNA-Sequenzen direkt auf dem Chip (photolitographisches
Verfahren)
• solche DNA-Chips haben typischerweise 25-50 Nukleotide lange DNAs
=> sucht quasi so lang ab, bis passendes Gegenstück gefunden ist, da Gegenstück-Sequenz bekannt ist, kann dadurch herausgefunden werden, wie der andere Strang aufgebaut ist und im ggs. zu normal abweicht
In welchen metabolisierenden Enyzmen kommen viele Polymorphismen vor?
CYP2D6, CYP3A4, UGTs
Beispiel für Polymorphismen: CYP2D6 -> wie man herausfindet, was für ein CYP2D6-Metabolizer man ist
• Die CYP2D6-Aktivität kann in der Klinik bestimmt werden, indem ein Test- Wirkstoff appliziert wird und ein Metabolit im Urin gemessen wird.
• Test-Wirkstoff Debrisoquin (Antihypertonikum), Metabolit: 4-OH-Debrisoquin
• Bestimmung des "Metabolischen Quotienten" (Metabolic Ratio MR) = Dosis Arzneimittel oder unverändertes Arzneimittels im Urin/Serum geteilt durch Konz. Metabolit
• nach dem MR teilt man die Individuen der Bevölkerung ein in
o Extensive metabolizers (EM); MR = 0,1-12,6
o Poor metabolizers (PM); MR >12,6
o Ultrarapid metabolizers (UEM); MR <0,1
Auswirkungen auf AS-Wirkung von Ultraextensive Metabolizern
normale AS: keine Wirkung, da zu schneller Abbau, keine therapeutische Spiegel
Prodrugs: schnelle Metabolisierung zum aktiven Metaboliten, dieser kann auch schon in toxische Dosen übergehen
Auswirkungen auf AS-Wirkungen bei poor metabolizern:
normale AS: zu starke Wirkung, da zu langsam abgebaut wird und somit hohe Plasmaspiegel vorhanden sind
Prodrugs: kaum therapeutische Spiegel, da kaum Umsetzung
Durch welche Polymorphismen wird das Blutungsrisiko bei Therapie mit Vitamin-K-Antagonisten erhöht? Mechanismus!
mehrere relevante Polymorphismen:
1. CYP2C9
2.Vitamin-K-Epoxid-Reduktase-Komplex (KVORC1)
3.CYP4F2
Durch welches CYP-Enzym wird Clopidogrel, was zur Reinfarktprophylaxe angewendet wird, metabolisiert?
CYP2C19, bei Polymorphismus langsame/wenig Bidlung des aktiven Metaboliten
Durch welches Enzym wird 6-Mercaptopurin metabolisiert?
Thiopurin-S-Methyltransferase (TPMT) -> bei Polymorphismus kein Abbau in das unwirksame S-Methylmercaptopurin
Vemurafenib: AS gegen was? Wie wirkt es? (nicht so wichtig)
1. Darreichungsform: Filmtablette
2. Indikation: Monotherapie zur Behandlung von erwachsenen Patienten mit BRAF-
V600-Mutation-positivem nicht resezierbarem oder metastasiertem Melanom
3. IC50 Anti-Zellproliferation 0,016-1,131 µM (BRAF-V600) vs. 12,06-14,32 µM (BRAF)
Welche Mutation tritt bei vielen Melanomen auf?
BRAF Mutation -> BRAF V 600
Gegen was ist Ivacaftor ein Medikament?
Mukoviszidose
Luciferase
Reportergen, oxidative Enzyme, die Biolumineszenz produzieren -> Luciferine (Naturstoffe, die zur Erzeugung von Licht durch Biolumineszenz genutzt werden) mit Sauerstoff, ATP o. Magnesium -> Reaktion zu Oxoluciferin -> Zerfall -> Biolumineszenz, haben meist pH-Optimum bei 6,3
Reportergen
Gen, mit dem bestimmte Effekte/ Qualitäten anderer Gene gezeigt werden können
