Methode zur Bestimmung der Konzentration von DNA
Welche Methoden
Welche Methoden
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Cartes-fiches
Mit welchen Methoden kann die Konzentration von DNA bestimmt werden.
Durch eine qPCR
Abschätzung im Agarosegel
Wie Wird eine cDNA hergestellt ausgehend von mRNA
1. Reverse Transkriptase Reaktion mit Oligo dt als Primer
2. RNA entfernen (RNase oder alkali)
3. Linker als Primer für zweite Stange ligieren
4. MIt DNA Polymerase Verlängern
Methode d. Proteinbestimmung bei der keine Proteinprobe durch die Reaktion verbraucht wird.
od280 und das Protein sollte gereingt vorliegen,
Welche EZ werden bei Immunnachweisen in der Regel verwendet?
Meeretichperoxidase
Alkalische Phosphate
Welche Zellen produzieren Antikörper
B-Zellen
Aussage über Monoklonale AK
Sie binden an das gleiche Antigen.
Sie haben krinr geringere Affinität als polyklonare
Wie funktioniert ein indirekter ELISA
1. AG auf Polystyrolplatte immobilisieren
2. Freie Bindungsstellen blockieren.
3. Primäre Ak zugeben.
4. Waschen.
5.Sekundäre Ak zugeben,
6. Farbreaktion
Wie werden Proteine bei der hydrophoben Interaktionschromatographie eluiert?
Erniedrigung der Ionenstärke
Wie sollte der pH-Wert bei einer Kationenaustauschchromatographie gewählt werden?
pH eine pH-Stufe unter dem pI des zu reinigenden Proteins.
Welche Trenngele werden zur Elektrophorese von kleinen Proteinen verwendet?
15% Trenngele
Wozu dient der BCA-Test?
Dienst der Proteinbestimmung. Cu2+ Reduktion zu Cu+durch Proteine, Im alkalischen BCA komplexiert zu Cu+ .
Absorption bei 562nm
Welche Puffersubstanz wird bei SDS- Page verwendet?
Glycin
Welche Moleküle werden bei einem Northern-Blot analysiert.
RNA
Welche AS gehören zu den basischen
1. Lysin
2. Histidin
3. Arginin
Affinitätschromatographie
1.Trennung durch spezielle Bindungseigenschaften
2. Bindungspartner kovalent an die Matrix gebunden
3. Elution durch kompetitoren
4. Eluation durch sauren pH Wert
Bei welchem pH-Wert erfolgt beim Edman-Abbbau die Reaktion mit Phenylisothiocyanat?
bei einem ph-Wert von 8
Mit welcher Methode können Biomoleküle für eine MS-Analyse ionisiert werden?
MALDI
Festphasensynthese von Peptiden Begriffe zuordnen
Muss ch. aktiviert werden: C-Terminus muss vor Nebenreaktionen geschützt werden.
N-Terminus
Welcher Tag eignet sich zur isolierung von Proteinkomplexen
FLAG-Tag
Substanz für eine Redox-Shuffle
DTT Dithiothreitol
Welche Information über ein Protein erhält man mit einer CD-Spektroskopie
Sekundärstruktur
Welche Aussgage über differentielle Zentrifugation sind korrekt?
1. Die Dichte ist konstant
2. Es werden mehrere Zentrifugationen mit jeweils erhöhter RZB gearbeitet.
