Molekularbiologische Techniken
Fragen aus den Aufträgen
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Cartes-fiches
Zählen Sie fünf Probematerialien auf, die in einem molekularbiologischen Routinelabor bearbeitet werden.
Blut, Knochenmark, Sputum, Bronchialsekret, Gewebe, Liquor, Haare, Guthriekarten etc.
Nennen Sie die zwei wichtigsten Punkte bei der Probeentnahme.
Geschlossenes System, Kein Heparin
Zählen Sie zwei Substanzen auf, die inhibitorisch wirken bezüglich einer nachfolgenden PCR.
Heparin, RNasen, Paraffin, EDTA in zu hoher Konzentration
Welche Vorsichtsmassnahmen treffen Sie im Umgang mit GelRed und weshalb?
Nitrilhandschuhe, Kapelle, Maske bei Bedarf, Schutzbrille bei Bedarf. Gemäss Herstellerdaten (SDB) handelt es sich nicht um einen CMR-Stoff, wir arbeiten am medi aber als wäre es ein CMR-Stoff analog des Ethidiumbromids
Welche Vorsichtsmassnahmen müsste man im Umgang mit Ethidiumbromid treffen und weshalb?
Nitrilhandschuhe, Kapelle, Maske bei Bedarf, Schutzbrille bei Bedarf. Es handelt sich um einen CMRStoff! Wenn keine Kapelle vorhanden ist, sollte ein entsprechender Atemschutz (FFP3/FFP2) getragen werden.
Wie werden die Elektrophoresekammern gewartet?
Mit fliessendem Wasser, anschliessend mit DM Wasser spülen um Salzablagerungen zu verhindern. Nicht mit Papier trocknen, da die Platinelektroden rasch zerstört werden könnten, kein Alkohol da Risse im Material entstehen könnten
Einige Proben brauchen vor einer Nucleinsäureextraktion noch eine Vorbehandlung. Welche Vorbehandlungen ist bei schmleimigem Sekret üblich?
Verflüssigung mit Hyaluronidase
Einige Proben brauchen vor einer Nucleinsäureextraktion noch eine Vorbehandlung. Welche Vorbehandlungen ist bei Paraffinschnitten üblich
Entparaffinierung durch Schmelzen (je nach Labor, resp. nach Extraktionsmethode werden die Paraffinschnitte ohne Entparaffinierung verwendet – Bsp. KSA Kantonsspital Aarau)
Einige Proben brauchen vor einer Nucleinsäureextraktion noch eine Vorbehandlung. Welche Vorbehandlungen sind bei den folgenden Probematerialien üblich? -> Zellarme flüssigkeit wie Urin
Zentrifugation
Wie werden DNA und RNA Extrakte gelagert? Wenn die Analyse innerhalb von 24 Stunden erfolgt?
Je nach Labor gelten hier andere Regeln/Vorgaben. DNA wird häufig bei 4°C gelagert und RNA bei -20°C, RNA kann aber auch bei -80° oder in Flüssigstickstoff gelagert werden.
Wie werden DNA und RNA Extrakte gelagert? Wenn die Analyse einige Wochen später erfolgt?
DNA bei -20°C, RNA bei -80° oder in Flüssigstickstoff