Molekularbiologische Techniken
Block 1-3
Block 1-3
Set of flashcards Details
| Flashcards | 95 |
|---|---|
| Students | 16 |
| Language | Deutsch |
| Category | Biology |
| Level | University |
| Created / Updated | 07.11.2021 / 21.12.2021 |
| Weblink |
https://card2brain.ch/box/20211107_molekularbiologische_techniken_MEX3
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| Embed |
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Was ist ein Pellet?
ein Sediment
Was ist ein Eluat?
Elution/Eluierung =Ab- oder Herauslösen von Substanzen aus einer stationären Phase, die sowohl aus festem & flüssigem Material. Dabei wird eine mobile Phase, die aus einem oder mehreren Lösungsmitteln besteht, an der stationären Phase vorbeigeführt. Das ausgetragene Gemisch aus Lösungsmitteln und gelösten Substanzen ist das Eluat (lat. eluere „auswaschen“).
Was ist ein Filtrat?
Durch Filtration geklärte, gereinigte Flüssigkeit
Unterscheidung RNA & DNA
- Vorkommen innerhalb der Zelle
- Struktur
Auf welcher Stufe gehört DNA?
Genom
Auf welche Stufe gehört RNA?
Transkriptom
Was ist ein Genom?
Gesamtheit der vererbbaren Informationen einer Zelle
Was ist ein Transkriptom?
Summe der zu einem bestimmten Zeitpunkt in einer Zelle transkribierten, das heißt von der DNA in RNA umgeschriebenen Gene, also die Gesamtheit aller in einer Zelle hergestellten RNA-Moleküle.
mRNA
Information zu Transkription
Was generiert eine Nano-Drop-Messung?
Informationen bezüglich der Konzentration (Menge) der extrahierten RNA & Informationen bezüglich Reinheit (Verhältnis zwischen RNA & Proteinen) der extrahierten RNA
Zellorganell mit tiefen pH-Wert
Lysosome
Funktion chaotrope Salze
entfernen Hydrathülle von Biomolekülen, so können positiv geladene Ionen (hohe Salzkonzentration!) Salzbrücken zwischen der negativ geladenen DNA & der negativ geladenen Silikamatrix ausbilden
Unterschiede Kits
- Beschaffenheit der Silikamatrix
- Kapazität
- Absorptionsstärke
- chaotrope Ionen
Welches Salz benutzen viele Silika-basierte Verfahren & weshalb?
Guanidinsalze, da sie ein starkes chaotropes Salz sind & effizient Zellen lysieren können
Mit was kann die Elution der DNA erfolgen, was ist dabei wichtig?
- mit TE oder H2O
- da EDTA nachfolgende Reaktionen stören kann, wird häufig mit H2O eluiert
- H2O muss aus Reinstwasseranlagen bestehen, mit pH-Wert 5,8-6,5 =sehr effiziente Elution
- 1 Tropfen basische Tris-Lösung in das H2O geben!
In welcher Zone wird die DNA extrahiert?
Nach der Tischdesinfektion mit 70% Ethanol & DNA/RNA-ExitusPlus werden die Handschuhe angezogen & die DNA-Extraktion kann gestartet werden.
In weichen Abfallbehälter kommt der Tischabfall (Plastiksäckli) mit den verwendeten Spitzen/Tubes etc?
Wlche Bestandteile im Blut enthalten genomische DNA?
Welche Informationen können aus DNA im Labor gewonnen werden?
Die erhöhte Temperatur des Heizblocks wird bei der DNA-Extraktion vor allem verwendet, damit der Lysis Puffer Optimal funktionieren kann.
Falsch, damit die Protease optimal funktionieren kann.
Das Salz im Lysis Puffer stabilisiert unter anderem den pH-Wert der Lösung
Richtig oder Falsch? Begründe.
Die Protease zerstört die Wasserstoffverbindungen von Proteinen (Histone, DNasen, Transmembranproteine etc.
Falsch, die Protease zerstört die Peptidbindungen
Die DNA wird aufgrund ihrer negativen Ladungen an die negativ geladenen Silikaoberfläche der Säure gebunden
Die Elutions Puffer löst im letzten Schritt der Extraktion die Verbindung zwischen DNA & der Silikaoberfläche, zudem wird durch den Elutions Puffer die Hydrathülle der DNA wird wieder hergestellt.
Welche Aussagen zum Zonenkonzept sind korrekt?
Die Handschuhe werden nur getragen, damit man sich selber vor den Reagenzien & Probematerialien schützen kann
Welche Aussagen zum Reinigungsmittel DNA-Exitus Plus sind korrekt?
Welche Aussage zur DNA-Exttaktion aus den Mundschleimhautzellen sind korrekt?
Welches ist die korrekte Eintauchtiefe für die 1000 ul Kolbenhubpipette?
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