Histologie

mehrere mm Durchmesser, Gewebszylinder (z.b Stanzen, Saugbiopsie)

mehrer cm Durchmesser, via OP (z.B Muttermahl)

einen Teil des Organs, via OPs, (z.B Lungenteilresektat)

ganzes Organ via OP z.B Mastektomie

1. Biopsie
2. Exzisat
3. Resektat
4. Ektomie

1. Vermeidung mechanische Artefakten
2. Genügen Probenmaterial
3. Fadenmarkierungen für Orientierung  dies mitteilen
4. sofort fixieren und einsenden
5. Gefäss beschriften und dicht verschliessen
6. Mehrere Gefässe nummerieren
7. spezielle Gefahren (radioaktiv, infektiös) Warnhinweis kennzeichnen

Fixierung führt zur Unterbrechung alles in der Zelle ablaufende Prozesse, stoppt Autolyse. Erhaltung des jetzigen Zustandes des Gewebes.

Ansonsten würde das Gewebe zerfallen/verfaulen

Hydrathüllen der Proteeine werden durch die unterschiedlichen Fixierungsmitteln beeinflusst und damit die Löslichkeit des Proteins verändert. Es kommt zur Ausfällung der Proteine.

ist eine Alternative zum Formalin wird aber hauptsächlich bei Proben für die Elektronenmikroskope verwendet oder in der Neuropathologie

Bildung von Fromalinpigment = unregelmässige verteilte braune doppelbrechende Niederschläge

1. gute Fixation mit Formalin
2. Vor Entkalkung wässern (Verhinderung Reaktion Fixationsmittel und Entkalkungsmittel)
3. Nach Entkalken wässern (Reaktion stoppen, keine Störung durch unlösliche Präzipiate
4. Nach Entkalken Routineverarbeitung (Entwässern, Ausgiessen)

1. Erhöhung Säurekonzentration
2. Erwärmung mit Mikrowelle
3. Ultraschall rasche und Zellschonende Entkalkung

Sollte Ammonium-gepuffertes EDTA verwenden

1. Proben annahme
2. LIS erfasst
3. Makroskopisch beurteilt und zugeschnitten
4. Einbettkasette
5. Formalin einlegen

1. Fixation
2. Makroskopie
3. Evtl. Entkalken
4. Entwässern
5. Ausgiessen
6. Mikrotomie
7. Färben
8. Entwässern
9. Eindecken
10. QC

Grund:

• warmer Block
• stumpfes Messer

Massnahme:

• Block kühlen
• Messer verschieben / neues

Grund:

• wackeliger Block / Messer
• Block löst sich von Kassette
• Messer zu steil
• Gewebe zu hart
• Gewebe mit kalk

Massnahmen:

• Block und Messer richtig einspannen
• Block neu giessen
• Freiwinkel richig einstellen
• Oberflächenentkalkung

Grund:

• zu kalt
• zu dicker Schnitt
• Winkel zu steil/flach
• Schraube locker

Massnahme:

• anhauchen / warten
• dünner schneiden
• Winkel korrigieren
• Schraubklemmen kontrollieren

Grund:

• zu grob angeschnitten
• ausgerissene Stellen auf der Schittfläche

Massnhame:

• fein anschneiden bis Ausrisse verschwinden

Grund:

• unregelmässige Klinge

Massnahme:

• Kline verschieben / neue Klinge

Grund:

• zu hohe Temp
• Paraffin mit Intermedium verunreinigt

Massnahme:

• Wasser kühlen
• Gewebe nochnmals für einige h in Vakuum-Infiltrationsbad

Grund:

• Gewebe von anderen Pat. auf Präparat

Massnhame:

• sauberes Arbeiten bei allen Abreitsschritten

Grund:

• Freiwinkel zu Flach

Massnahme:

• Winkel steiler stellen
• Einstellungen erhöhen

• Damit Gewebe gleichmässig gefestigt wird -> mikrometerdünne Schnitte
• Damit Schnittrichtung je nach Fragestellung festgelegt werden kann
• gleichbleibende Qualität der Schnitte ermöglichen

Vergleichbarkeit mit anderen Instituten im Bezug auf:

• Härte
• Homogenität

Ziel: Gewebs- und Fxierflüssigkeit (Wasser & Formalin) durch Einbettmedium Paraffin ersetzten

• Paraffin dringt in Hohlräumer des Geweves ein
• Da Paraffin hydrophob = Entwässerung mit aufsteigender Alkreihe
• Paraffin durch Hitze verflüssigen zum Eingissen
• Parafifin bei RT fest, für Schnitte

Nein

Schwammiges, parenchymreiches &feinproiges Gewebe = weniger lang

Hartes, dichtes oder fettiges = länger

Gewebeblockdicke = mitberücksichtigen

Höhere zu niedrigerer Poolarität (Schrumpfen des Gewebes)

• Polar: Wasser
• Unpolar Paraffin

Konzentationsunterschiede zu hoch = starke Schrumpfung

Je empfindlicher, umso geringer Konzentrationsunterschied

Wässrige Fixantien nicht mischbar

Alkohol verdrängt Wasser -> Intermedium (Xylol) verdrängt Alkohol (clearing) -> Paraffin verdrängt Intermedium (Infiltration)