IHC


E. L.
Karten
9
Lernende
4
Sprache
Deutsch
Kategorie
Medizin
Stufe
Andere
Erstellt / Aktualisiert
31.10.2020 / 17.11.2020

Lernkarten

Grundlegendes Fuinktionsprinzip Immunhistochemie !!!!

Antigen-Antikörper + Sichtbarmachung

Direkt oder Indirekt

Direkt vs. Indirekt

Direkt:
-weist AG mit nur einem AK nach

Indirekt:
-weist AG mit 2 (Primär& sekundär) AK nach -> Sensitiver

 

Wieso ist die Fixierung bei der IHC so essenziell?

Nur durch die Fixation werden AG überhaupt dem IHC-Nachweis zugänglich gemacht


MERKE:
zu lange oder zu kurz Fixiert = falsch negativ
 

Was heisst ''überfixiert''?

wenn das Gewebe zu lange im Formalin gelegen hat

-> kann nicht mehr demaskiert werden = Falsch negativ

Anwendungsbereich IHC (4)
 

•Tumor-/Lymphomdiagnostik

•Erregerdiagnostik

•Bestimmung von prognostischen Faktoren

•Bestimmung therapierelevanter Faktoren

6 Schritte: !!

•Antigendemaskierung

•Endogener Enzymblock

•Primärantikörper

•Sekundärantikörper

•Visualisierung

•Gegenfärbung

•Antigendemaskierung
-rückgängig machen der Fixierung, wiederherstellung des 3Dimensionalem Epitop

•Endogener Enzymblock
-blockierung der Endogenen Enzymaktivität

•Primärantikörper
-bindet an die gesuchte Struktur auf dem Gewebe

•Sekundärantikörper
-bindet auf dem Primärantikörper -Markiert

•Visualisierung
-meist an Sekundär-AK gebunden (z.B Enzym, Bild)

•Gegenfärbung:
-je nach dem schwach/stark

6 Schritte:

Welche Antigendemaskierungsmethoden gibt es? (2)

Htze:
-Hitzevorbehandlung
-zunahme der Spezifität
-verringerung der Hintergrundfärbung


Enzymatischer Andau

(5 Beurteilungskriterien IHC) nicht gemacht

Signal:
-Ja/Nein

Signal an der richtigen Struktur:
-falsch neg/pos

Signalstärke:
-wenig, mässig, stark

Hintergrundfärbung:
-wie stark mitgefärbt

Gegenfärbung:
-wie stark gegengefärbt

Primär und Sekundär Antikörper sind nie ___ ___ _____  _______.

von der gleichen Spezies

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