Histologie 3
Versilberung
Versilberung
Was wird ''eigentlich'' mit der Versilberung nachgewiesen und was kann Histologisch dargestellt werden?
Aldehydgruppen
-Retikuläre Fasern / Basalmembran
-Melaonzyten
-Nervenzellen
-Neuroglia
-Mikroorganismen wie Pilze
allgemeines Prinzip:
An die zu darstellende Struktur lagern sich Silberionen an. Durch diese Zellbestandteile oder durch ein Reduktionsmittel werden die Silberionen zu elementarem Silber reduziert. Der gebil- dete Metallniederschlag stellt die Struktur schwarz dar.
Versilberung nach Gomori - 6 Schritte
Was passiert?
1) Aldehydgruppen bilden
-Glykoproteine werden zu Aldehydgruppen reduziert
2) Sensibilisieren
-der genaue Vorgang ist nicht bekannt
3) Imprägnation
- Ag+ -> Ag
4) Reduktion in Formalin
-weitere Silber-Ionen binden sich selektiv -> wird schlagartig schwarz
5) Fixieren
-Silberchlorid wird entfernt -> verhindert nachschwärzung
6) Gegenfärbung
-Kernechtrot -> darf nicht zu stark ausfallen
Was bewirkt Tonen in Goldchlorid?
-schärferes Bild
-reduktion der Hintergrundfärbung
MERKE: Muss nicht gemacht werden. Wenn es gemacht wird -> als 5ter Schritt
Klinische anwendung? 2
• Die Darstellung retikulärer Fasern kann bei der Differentialdiagnose bei bestimmten Tumoren (Lymphome, Leberzellkarzinome) behilflich sein.
• Die Veränderung normaler retikulärer Fasermuster, bei Erkrankungen des roten Knochemakres oder der Leber, kann dargestellt werden.
Argentaffine Reaktion
Argyrophile Reaktion
Argentaffine Reaktion Das Gewebe, respektive bestimmte Anteile davon sind fähig Silbersalze (Ag+ - Ionen) selbst zu elementarem Silber (Ag0) zu reduzieren.
Argyrophile Reaktion Diese Versilberungen benötigen ein Reduktionsmittel. Die sich an die Struktur angelagerten Silberionen (Ag+) werden durch ein Reduktionsmittel (in der Regel Formalin) zu elementarem Silber (Ag0) reduziert.
Gomori
Wichtiges zu beachten?
•Saubere Gefässe (Staub reduziert Silbenitrat!)
•Keine Metallpinzetten
•Silberlösung sorgfältig herstellen
•Silberlösung immer verschlossen halten, dunkel lagern (Licht reduziert Silbernitrat!)
•Spülschritt zwischen Silberlösung und Formalin
•Alter der Färbelösungen, insbes. Ammoniak
•(Zeit im Xylol)
Achtung: Eingetrocknete silberlösungen _____ ______.
Explodieren Spontan
mögliche Fehler:
Spühlschritt im H2O zwischen Silberlösug und Formalin
-zu lange?
-Zu kurz?
zu kurz:
-diffuse silberniederschläge
zu lang:
-zu viele Silberionen werden entfernt
mögliche Fehler:
Fixation im Natriumthiosulfst zu lange?
Würde wieder entfernt werden
Quelitätskiriterien?
Kontrollgewebe?
Reti:
-schwarz
Kollagen:
-braun
Kerne:
-rötlich bis braun
Gegenfärbung:
-dezent Rot
-> Retikuläre Fasern
-> Sollten durchgezogen sein
-> Kontrollgewebe: Leber
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Was wird ''eigentlich'' mit der Versilberung nachgewiesen und was kann Histologisch dargestellt werden?
Aldehydgruppen
-Retikuläre Fasern / Basalmembran
-Melaonzyten
-Nervenzellen
-Neuroglia
-Mikroorganismen wie Pilze
allgemeines Prinzip:
An die zu darstellende Struktur lagern sich Silberionen an. Durch diese Zellbestandteile oder durch ein Reduktionsmittel werden die Silberionen zu elementarem Silber reduziert. Der gebil- dete Metallniederschlag stellt die Struktur schwarz dar.
Versilberung nach Gomori - 6 Schritte
Was passiert?
1) Aldehydgruppen bilden
-Glykoproteine werden zu Aldehydgruppen reduziert
2) Sensibilisieren
-der genaue Vorgang ist nicht bekannt
3) Imprägnation
- Ag+ -> Ag
4) Reduktion in Formalin
-weitere Silber-Ionen binden sich selektiv -> wird schlagartig schwarz
5) Fixieren
-Silberchlorid wird entfernt -> verhindert nachschwärzung
6) Gegenfärbung
-Kernechtrot -> darf nicht zu stark ausfallen
Was bewirkt Tonen in Goldchlorid?
-schärferes Bild
-reduktion der Hintergrundfärbung
MERKE: Muss nicht gemacht werden. Wenn es gemacht wird -> als 5ter Schritt
Klinische anwendung? 2
• Die Darstellung retikulärer Fasern kann bei der Differentialdiagnose bei bestimmten Tumoren (Lymphome, Leberzellkarzinome) behilflich sein.
• Die Veränderung normaler retikulärer Fasermuster, bei Erkrankungen des roten Knochemakres oder der Leber, kann dargestellt werden.
Argentaffine Reaktion
Argyrophile Reaktion
Argentaffine Reaktion Das Gewebe, respektive bestimmte Anteile davon sind fähig Silbersalze (Ag+ - Ionen) selbst zu elementarem Silber (Ag0) zu reduzieren.
Argyrophile Reaktion Diese Versilberungen benötigen ein Reduktionsmittel. Die sich an die Struktur angelagerten Silberionen (Ag+) werden durch ein Reduktionsmittel (in der Regel Formalin) zu elementarem Silber (Ag0) reduziert.
Gomori
Wichtiges zu beachten?
•Saubere Gefässe (Staub reduziert Silbenitrat!)
•Keine Metallpinzetten
•Silberlösung sorgfältig herstellen
•Silberlösung immer verschlossen halten, dunkel lagern (Licht reduziert Silbernitrat!)
•Spülschritt zwischen Silberlösung und Formalin
•Alter der Färbelösungen, insbes. Ammoniak
•(Zeit im Xylol)
Achtung: Eingetrocknete silberlösungen _____ ______.
Explodieren Spontan
mögliche Fehler:
Spühlschritt im H2O zwischen Silberlösug und Formalin
-zu lange?
-Zu kurz?
zu kurz:
-diffuse silberniederschläge
zu lang:
-zu viele Silberionen werden entfernt
mögliche Fehler:
Fixation im Natriumthiosulfst zu lange?
Würde wieder entfernt werden
Quelitätskiriterien?
Kontrollgewebe?
Reti:
-schwarz
Kollagen:
-braun
Kerne:
-rötlich bis braun
Gegenfärbung:
-dezent Rot
-> Retikuläre Fasern
-> Sollten durchgezogen sein
-> Kontrollgewebe: Leber
