Kl. Chemie

-kleinster Abstand zweier Punkte gleicher Phase

Wird in nanometer angegeben 

 

400nm bis 800nm

Beide nicht sichtbar für das menschliche Auge

Ultraviolett:
-energiereich
-hochfrequentiert
-schädigend

Infrarot:
-energiearm
-niedrig frequentiert
-erwährmend
 

Die komplemäntere Farbe wird am meisten absorbiert.
 

z.B:
Frabe der Lösung                         absorbiertes Licht
   ROT                                                    Grün

Lichtquelle -> Blende1 -> Prisma  -> Blende2  -> Küvette -> -> Dedektor
                                        (Gitter)
                                        (Filter)

Io 
Eingestrahlte Intensität

I1
geschwächte Intensität

• Licht mit bekannter Anfangsintensität  und einer bestimmten Wellenlänge wird durch die Probe geschickt.

-> Das Verhältnis I/���� wird als Transmission Tbezeichnet.

E = Mas für die ''Absorptionsintensität'' der Lösung. 

Ohne Maßeinheit 

Mithilfe der Extinktion wird die Konzentration einer Lösung berechnet


 

Bei nicht allzu stark konzentrierten Lösungen gilt das Lambert-Beeŕsche Gesetz: Die Extinktion ist proportional dem Produkt der Stoffmengen- Konzentration c und der Dicke d der absorbierenden Flüssigkeitsschicht.

 

Merke:

• gilt nur für verdünnte Lösungen (meist kleiner 0,01 mol·l−1)• gilt nur für monochromatisches Licht
• gilt nur bei homogener Verteilung der Substanz
• gilt nur bei vernachlässigbare Eigenemission

Die Transmission ist Licht, welches eine Lösung durchdringt und vom Detektor gemessen wird. Sie verhält sich proportional zur Extinktion

Die Absorption ist also abhängig von: Wellenlänge 
Der (Atom-) Konzentration der Lösung Der Reflektion

• Man unterscheidet zwischen transmittierenden und reflektierenden Gittern.

• Transmittierende Gitter bestehen aus Glas das Licht geht durch die Glasgitter

• reflektierende wirken wie ein Spiegel und bestehen aus Aluminium

-nur eine Position für die Küvette
-es kann nur eine Küvette nach der anderen gemessen werden

-Licht wird durch einen halbdurchlässigen Spiegel aufgespalten
-zwei separate Dedektoren
-2 Messugen gleichzeitig möglich

-rotierende Spiegel
-ermöglicht abwechslungsweise einen der beiden lichtstrahlen zu messen
-nur einen Dedektor

• Das Licht wird erst nach dem Durchtritt durch die Küvette in die einzelnen Wellenlängen aufgespaltet

• Für jede Wellenlänge gibt es eine Fotodiode als Detektor mehrere Analyte können gleichzeitig gemessen werden

• Küvetten nicht am Strahlengang berühren (Fingerabdrücke)

• Filter niemals mit den Fingern berühren
• Alte Fotometer einbrennen lassen (ca. 15 Minuten)

• Niemals direkt in eine brennende UV-Lampe blicken, da die Gefahr von Augenschäden besteht.

-Extrinktion wird erst nach vollständigem Ablauf der Chemischen Reaktion bestimmt

Probenleerwert & Reagenzleerwert müssen evt. berücksichtigt werden

• Die Extinktionsänderung pro Zeiteinheit (2 Messungen)

• Bei kinetischer Messung ist in der Regel kein Proben- oder Reagenzienleerwert notwendig, da die Extinktionsänderung pro Zeiteinheit gemessen wird.

Vorteile

• Messung findet schneller statt, da nicht auf gesamten Reaktionsablauf gewartet werden muss

• Benötigt kleiner Enzymmengen als Endpunktmethode

Nachteile

• Konstante Reaktionsbedingungen (pünktliches Ablesen der Absorption)