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Histologische Technik 1

Von Probenentnahme bis Eindecken.

Von Probenentnahme bis Eindecken.

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Flashcards 33
Language Deutsch
Category Medical
Level Vocational School
Created / Updated 01.12.2015 / 07.11.2016
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Study

Nenne die 8 Schritte der routinemäßigen Einbettung.

  1. Probenentnahme
  2. Fixation (mit Formalin)
  3. Probenpräparation
  4. Spülen
  5. Einbettung (mit Paraphin)
    1. Dehydratation
    2. Intermedium
    3. Einbettung
    4. Ausgießen
  6. Schneiden
  7. Färben
  8. Eindecken

Was ist bei der Entnahme für die Histologie zu bedenken?

  • erforderliche und sinnvolle pathologisch- anatomische Entnahmelokalisation 
    • Übergang von gesundem zum kranken Gewebe
  • Vermeidung von Artefakten
  • Dokumentation
  • Größe der Organ- oder Gewebeproben
  • Wahl des geeigneten Präparierbestecks

Was bedeutet "ureter"?

Harnleiter

Was bedeutet "urethra"?

Harnröhre

Welche Schritte hat man beim Gefrierschnitt (Schnelldiagnostik)?

  1. Materialentnahme
  2. frisch, unfixiert in flüssigen Stickstoff -> Gefrierschneiden
  3. Fettfärbung
  4. Gefrierschneiden
  5. Färbung
  6. Eindecken

Welchen Zweck verfolgt die Fixation?

  • Verhinderung postmortaler Veränderungen
  • "Äquivalentbild" sollte optimal erhalten sein
  • Konservierung
  • Härten des Gewebes und Verbesserung der Färbeeigenschaften

Welche Möglichkeiten der Fixation gibt es?

  1. Trocknung/ bzw. Ausstrich -> Lufttrocknung/ Hitzetrocknung/Gefriertrocknung
  2. Kälterverfahren -> Flüssigfrierverfahren/ Gefriersubstitution/Tiefgefrieren
  3. Fixationsflüssigkeiten -> Immersionsfixation (Routine)/ Perfusionsfixation (Ganzkörper, Organe)

Welche Fixationseffekte/ Einflüsse gibt es?

  1. Fällungen
  2. Schrumpfung/Quellung
  3. Auflösen der Zellstrukturen
  4. Bildung von Nova (Neue Strukturen)
  5. Niederschläge
  6. Autolytische Veränderung
  7. Eintrocknung
  8. Härtung (Ziel)

Welche Strukturen gibt es bei der Fixation?

 

Fixationsstabile Strukturen

Fixationslabile Strukturen

Maskierte Strukturen (erst durch Fixation sichtbar)

Was bedeutet Autolyse (Fixation)?

Eigenzerstörung der Zellen durch Fermente oder Enzyme ohne Beteiligung von Sauerstoff

Was bedeutet Fäulnis (Fixation)?

 

Gewebezerstörung unter Mitwirkung von Bakterien

Was bedeutet Verwesung (Fixation)?

Gewebezerstörung unter Mitwirkung von Luftsauerstoff

Beschreibe den Fixationsvorgang!

  1. Wasserentzug (Eiweißdenaturierung durch Entfernung der Wasserhülle)
    1. Alkohol
    2. Aceton
  2. Salzbildung (Verbinden der Proteine mit chemischen Substanzen -> Salzbildung)
    1. Sublimate (Quecksilberchlorid) -> Schwermetallsalzlösung
    2. Uranylacetat -> Schwermetallsalzlösung
    3. Pikrinsäure -> Proteinpikrat
  3. Änderung des Quellzustandes
    1. Essigsäure
    2. Chromsäure
  4. Vernetzung
    1. Formalin
    2. Gluta(di)aldehyd
    3. Osmiumsäure

Wovon ist es Abhängig welches Fixationsmittel man gebraucht?

  1. Zeitpunkt des Beginns der Fixation
  2. Größe des Materials der Probenentnahme
  3. Mengenverhältnis von Objekt zu Flüssigkeit
  4. Dauer
  5. Temperatur
  6. Konzentration
  7. pH-Wert
  8. Osmotischer Druck
  9. Diffusionsvermögen

Zum Beispiel: Formalin

10%ig    nach 16h -> 6mm / nach 40h -> 15mm
  4%ig     nach 16h -> 4mm/ nach 40h -> 6mm

Welche Fixationsmittel gibt es?

  1. Formalin
  2. Alkohol
  3. Aceton
  4. Essigsäure
  5. Trichloressigsäure
  6. Sublimat
  7. Chromsäure
  8. Osmiumsäure
  9. Pikrinsäure
  10. Uranylacetat
  11. Sulfosalicylsäure
  12. Glutar(di)aldehyd

Erkläre den Begriff "Formalin".

  1. Formaldehyd  H-C=O
                                   |
                                  H
  2. Aldehyd der Ameisensäure (gasförmig)
  3. Formol: 30%-40% Lösung
  4. Formalin: 4%-10% Lösung (gebrauchsfertig)
  5. Vorteile: 
    1. gutes Diffusionsvermögen
    2. Härtet gut aus
    3. konserviert über Jahre
    4. eignet sich für fast alle Untersuchungen 
    5. preiswert
  6. Nachteile
    1. nicht geeignet für Glykogendarstellungen
    2. enzymatische Aktivitäten + antigene Eigenschaften gehen verloren
    3. Formalindämpfe (reizend)

Welche Eigenschaften hat Alkohol als Fixationsmittel?

  1. 96%ige Lösung
  2. Vorteile:
    1. Chemisch inaktiv
  3. Nachteike: 
    1. Starke Schrumpfung und Härtung
    2. löst Fette und Cholesterinablagerungen auf -> Substanzfluchtphänomen

Ablauf der Einbettung:

  1. Dehydratation
  2. Intermedium
  3. Einbettung
  4. Ausgießen und Erstarren

Nennen sie zwei Einbettmittel

Paraffin und Gelatine

Was ist ein Intermedium?

Dehydratationsmittel & Einbettmedium phasenlos löslich -> "Zwischenmittel"

Nennen sie das wichtigste Dehydratationsmittel.

Ethanol

Welches Prinzip liegt der Fixation mit Formalin zugrunde?

Aufbrechen der Peptidbindungen & Vernetzung der Eiweiße

Was ist ein Gewebe ?

Gewebe = Verband aus Zellen + Interzellularsubstanz

Woraus bestehen Zellen?

Zellen = Nukleus + Zytoplasma

Woraus besteht die Interzellularsubstanz?

Interzellularsubstanz = Grundubstanz + Fasern

Welche Fasern/ Fibrillen kennst du?

  • Collagenphasern
  • Elastische Phasern
  • Retikuläre Phasern

Fixation mit Glutardialdehyd?

  • wichtigste Fixationsmittel für Elektronenmikroskope
  • 1-5%ige gepufferte Lösung
  • oder im Gemisch nach Karnoysky
  • Fixtionsdauer: mehrere Tage -> sehr geringes Diffusionsvermögen
  • Optimale Erhaltung der Ultrastruktur
  • langame Diffusiom, sehr lange Fixationsdauer

Probenpräparation

  • Proben werden aus dem Glaß entnommen (Einsendungsgefäß) und so zugeschnitten, das sie für die weitere Präparation die korrekte Schnittfläche zeigen und an die später zu benutzende Gießform angepasst sind.

Spülen

  • überschüssige/ überflüssige Fixationsflüssigkeit wird entfernt
  • so werden Einflüsse auf die Einbettung /Einfärbung vermieden

Formalin = Leitungswasser
Trichloressigsäure = 96%iger Alkohol
Bouinsche Lösung = 70%iger Alkohol
Alkohol = absoluter Alkohol
Glutardialdehyd = Cacodylat
 

 

Bestandteile Bouinsche Lsg?

Pikrinsäure, Formalin, Eisessig

Was ist bei der Probenentnahme zu berücksichtigen?

erforderliche und sinnvolle pathologisch - anatomische Entnahmelokalisation

-> Vermeidung von Artefakten

-> Dokumentation

-> Größe des Organs (Paraffin 1cm)

-> Wahl des geeignetes Präparationsbestecks

Wie sieht ein Gefrierschnitt (Schnelldiagnostik) aus?

  1. Probenentnahme
  2. frisch, unfixiert Gefrierschneiden (flüssiger Stickstoff)
  3. färben
  4. eindecken

Das Gefrierschneiden ist auch nach dem Spülen möglich.

Welche Möglichkeiten der Fixation gibt es?

  • Trocknung
    • Luftrocknung, Hitzetrocknung, Gefriertrocknung
  • Kälterverfahren
    • Flüssiggefrierverfahren
    • Gefriersubstitution
    • Tiefgefrieren
  • Fixationsflüssigkeiten
    • Immersionsfixation (Routine)
    • Perfusionsfixation (Ganze Körper/Organe)

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