Gentechnik
Biochemie
Biochemie
Kartei Details
| Karten | 50 |
|---|---|
| Sprache | Deutsch |
| Kategorie | Medizin |
| Stufe | Universität |
| Erstellt / Aktualisiert | 06.11.2014 / 19.06.2017 |
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Was sind die "Werkzeuge" der DNA
4 Pkte
Plasmide
Restriktionsendonukleasen = Restriktionsenzyme
reverse Transkriptase
evtl andere Enzyme (DNA Ligase, DNA Polymerasen Phosphatasen, Polynukleotidkinasen)
Was sind Plasmide
5 Pkte
1. ringförmig
2.doppelsträngig
3. extrachromosomal
4.. replizieren autonom
5. bakterien
Wozu brauchen Bakterien Plasmide
NICHT essentiell
bieten aber Selektionsvorteile ---> zB Resistenzen
Was ist die Konjugation in der Gentechnik
2 Pkte
horizontaler Gentransfer
Übertragung von Genen zwischen Bakterien
Was ist horizontaler Gentransfer
2 Pkte
Konjugation
Übertragung von Genen zwischen Bakterien
welche Aufgaben haben Resistenzplasmide
2 Pkte
codieren für Enzyme die bestimmte Antibiotika spalten bzw hemmen
codieren für transportsysteme die das Antibiotikum sofort herausschleusen
Was ist ß - Lactamase
2 pkte
bakterielle Penicilinase
spaltet ß Lactamring des Penicilins ----> Hemmung
Was ist eine Penicilinase
2 Pkte
zB ß-Lactamase
spaltet ß lactamring des Penicilins ----> Hemmung
Was macht ein Klonierungsvektor?
Bsp
4Pkte
Plasmide
DNA Transportvehikel
Einschleusung in Bakterien
----> Replikation der eingeschleusten DNA
Syn Restriktionsendonukleasen
Restriktionsenzyme
syn Restriktionsenzyme
Restriktionsendonukleasen
Def Restriktionsenzyme
3Pkte
Restriktionsendonukleasen
bakterielle Enzyme
Hydrolyse Phosphodiesterbindungen an spez Stellen in DNA
REstriktionsfragmente
Was ist die "natürliche" Aufgabe der Restriktionsendonukleasen
1 Pkt
Restriktionsenzyme
bauen eingedrungene Fremd-DNA ab im Bakterium
Was ist rekombinante DNA
durch Gentechnik neu kombinierte DNA
Zu was werden Restriktionsendonukleasen in der Gentechnik eingesetzt?
3Pkte
DNA Kartierung
DNA Klonierung
Herstelleung rekombinanter DNA
Welche beiden Aktivitäten besitzt die reverse transkriptase
2 Pkte
DNA Polymerase Aktivität (DNA Synthese)
Ribonuklease (Abbau von RNA)
Was ist die Aufgabe der reversen Transkriptase
Transkription einzelsträngiger RNA in doppelsträngige DNA
Welche Funktion erfüllt die reverse Transkriptase in der Gentechnik
1 Pkt
Herstellung komplementärer DNA = cDNA aus RNA
Was ist die Klonierung
Vermehrung bestimmter DNA Moleküle in Wirtszelle = von einem Ausgangsmolekül sollen beliebig viele Kopien hergestellt werden
Was wird bei der Klonierung gebraucht?
5 Pkte
Spender DNA
Klonierungsvektoren
Restriktionsendonukleasen
DNA Ligasen
Empfängerzellen
Welche drei Möglichkeiten gibt es Fremd DNA in Bakterien einzuführen
Konjugation
Transformation
Transduktion
WAs ist Transformation
Aufnahme "nackter" DNA in Bakterien
Was versteht man unter Transduktion
Einführung von bakterieller DNA zusammen mit Phagen DNA in Bakterien
WAs ist eine transfektion
Aufnahme nackter DNA durch eukaryontische Zellen
Was ist eine Genbibliothek
komplettes genom eines Organismus
Population klonoerter DNA Fragmente
Was ist eine cDNA Banke
sämtliche mRNA die in einem Zelltyp oder Gewebe vorkommen
ohne Promotor und Introsequenzen
Was enthält keine Introns und Promotoren?
cDNA oder genomische Genbank
cDNA
Was ist eine Polymerasekettenreaktion
2 Pkte
Amplifizierung spez DNA Sequenzen
in vitro DNA Replikation
Was wird für die PCR benötigt
6 Pkte
DNA Matritze = Template
thermostabile DNA Polymerase
zwei verschiedene Primer
dNTPs
Puffer
MgCl
WElche drei Schritte laufen in der PCR ab
Denaturierung
Annealing (Hybridisierung der Primer)
DNA Synthese
PCR: Was passiert während der Denaturierung
DNA Matritze in Einzelstränge bei 95°
PCR: Was passiert beim Annealing
Hybridisierung der Primer
= Primer lagern sich an DNA Einzelstränge an
Primerspez Temperatur
PCR: Was passiert während der DNA Synthese
thermostabile DNA Polymerase verlängert die Primer mit dNTPs
Temp 70°
Wie erhöht sich die DNA nach 20 bis 40 Zyklen in der PCR
106 - 1012
Mit welchem Verfahren kann amplfizierte DNA nachgewiesen werden
Gelelektrophorese
Wozu dient die RT-PCR
mit reverser Transkriptase
Nachweis von RNA
Was ist die Aufgabe der Gelelektrophorese
2 Pkte
Methode zur Trennung geladener Teilchen
nach Größe und ladung
Warum kann mit Hilfe der Gelelektrophorese DNA nachgewiesen werden
DNA ist negativ geladen
wandert im elektr Feld zur Anode
Was ist Blotting
4 Pkte
Souther ---> DNA
Northern ---> RNA
Western ---> Proteine
werden von Gel auf eine Membran übertragen um dann bestimmte Moleküle nachzuweisen
Was ist die Hybridisierung im Blot-Verfahren
2 Pkte
Zusammenlagerung komplementärer Nujkeinsäurefragmente ----> Wasserstoffbrückenbildung
----> so können Nukleinsärefragmente nachgewiesen werden
