Kl. Chemie
Grundlagen und Trennverfahren
Grundlagen und Trennverfahren
Set of flashcards Details
| Flashcards | 115 |
|---|---|
| Language | Deutsch |
| Category | Medical |
| Level | Vocational School |
| Created / Updated | 11.04.2025 / 19.05.2025 |
| Weblink |
https://card2brain.ch/box/20250411_kl_chemie
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| Embed |
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Beschreibe die Immunelektrphorese
Kombinatin aus Elpho und Immundiffusion
Quantitativer Nachweis von monoklonallen Gammopathien
Serum wird elektrophoretisch aufgetrennt -> AK wird zugegeben -> Proteine im Serum wandern Ak entgegen
Beschreibe die Immunfoxationselektrophorese
Qualitativer Nachweis monoklonaler Gammopathien, Bence-Jones Proteinämie
Auftrennung im Gel
Frei Ak werden abgewaschen -> Immunkomplexe bleiben im Gel fixiert
Monoklonale Immunglobuline werden nach anfärben als Banden sichtar
Was ist ein Immunoassay
quantitatives Messverfahren -> Analyt durch Ag-Ak-Komplex nachweisbar
Was ist der unerschied zwischen Homogenem und Heterogenem Immunoassay
Homogen: Ag-Ak-Reakion in flüssiger Phase; keine Trennschicht nötig
Heterogen: Ag-Ak-Reaktion in fester Phase; Trenn/Waschschritt nötig
Nenne die vier ELISA-Techniken
direkter ELISA
indirekter ELISA
Sandwich ELISA
Kompetetiver ELISA
Beschreibe den direkten ELISA und nenne einen Nachteil
= Detektion des Ag mit primären Ak
Bei Waschschritt: abwaschen ungebundener Ak
Nachteil: für jedes Ag muss passender Ak markiert werden
Beschreibeden indirekten ELISA und einen Vorteillll
= Detektin des Ag mit sekundärem Ak
2 Waschphasen
Vorteil: größere Fllexibilität
Beschreibe den Sandwich ELISA und nenne einen Vorteil und die Voraussetzung
= Detektion des Ag zwischen zwei Ak
Voraussetzung mind. zwei Ak-Bindestellen am Ag
Vorteil: einsetzbar wenn Ag-Konzentration sehr gering/ andere Ag-Konzentration zu hoch
Beschreibe den kompetitiven ELISA und was ist bei viel/wenig Analyt der Fall
Konkurrenz zweier Ag um Bindungsstelle am Ak
Je weniger Ag in Probe, desto mehr Ak binden -> hohe Farbintensität
Wenig Analyt: alle Paratope werden besetzt
viel Analyt: schwache Farbreaktion
Was sind radioaktive Immunoassays? Nenne beispiele und ein Beispiel für deren Anwendung
= nicht Enzym- sondern radioaktiv markiert
RIA, IRMA
Anwendung: zb Aldosteron im Pllasma
RIA ausgesprochen und was ist radioaktiv markiert?
Radioimmunoassay: Ag radioaktiv markiert
IRMA ausgesprochen und was ist radioaktiv markiert
Immunoradiometrischer Assay: Ak radioaktiv markiert
Beschreibe den kompetitiven RIA
Trennung von freier und gebundener Radioaktivität
Enzym-gekoppelte Ak müssen abgetrennt werden (zb durch Chromatographie, Adsorption)
Beschreibe den Nicht-kompetitiven IRMA
=Prinzip wie Sandwich ELISA
Messung der gebundenen radioaktiven Sandwichkomplexe -> Radioaktivität
direkt proportional zur Ag-Konzentration der Probe
Was ist die Photometrie?
= Methode, bei der Konzentration eines gelösten Stoffes durch Llcithmessung ermittelt wird
Was istdie Voraussetzung für Photometrie
der zumessende Stoff muss farbig sein
Nenne das Prinzip der Photometrie
Absorption wird gemessen durch Vergleich der Intensität des einfalllenden und des durchgelassenen Restlichts mithilfe eines Photometers
Nenne die Betsandteile eines Photometers
Lichtquelle
Kollektor
Filer/Monochromator
Blende
Küvette mit Analysenlösung
Strahlungsempfänger
Elektronik und Messanzeige
Was ist die Absorptionsphotometire?
Bestimmung der Konzentration eines gelösten Stoffes durch Messung der Lichtapsorption -> quantitativ
Nenne das Lambert-Beersche Gesetz
Alambda=ac * c * d
Wofür steht Alambda beim Llambert-Beerschen Gesetz?
Absorption bei bestimmter Wellenlänge
Wofür steht ac beim Lambert-Beerschen Gesetz?
Proportionalitätsftor (substratspezifische Konstante)
Wofür steht c beim Llambert-Beerschen Gesetz
Konzentration des Stoffes
Wofur steht d beim Lambert-Beerschen Gesetz?
Schichtdicke der Küvette (1cm; ganze Küvette)
Für welche Messung gilt das Lambert-Beersche Gesetz?
für photometrische Messung mit monochromatischem Licht (bestimmte Welllenlänge) und verdünnter Lösung
Wann wird direkte Absorptionsphotometire angewendet?
für farbige Substanzen -> absorbieren im sichtbaren Bereich
Wann wird indirekte Absorptionsphotometrie angewendet?
Analyt muss durch chemische Reaktion in eine absorbierende Substnz umgeandelt werden
Enzym = Katalysator, der msetzung von SUbstrat in Coenzym beschleunigt, spezifisch fr bestimmte Substanzen
Wie wird Substrat bestimmt
duch Endpunktanalyse (quantiativ)
Wie wird Enzymaktivität bestimmt
kinetische Messung
Beschreibe die direkte Methode zur Enzymaktivitätsmessung
Messung der Abnahme der Absorption bei Abnahme der Konzetration des Substrats/Coenzyms oder Zunahme der Absorption bei Zunahme des Produkt (Alkalische Phosphatase)
Beschreibe die indirekte methode der Enzymaktivitätsmessung
an enzymatische Reaktio wird Indikatorreaktion angeschlosen
Was ist die Flammenemmissionsphotometrie
= Messung der Llicht-Emission zur quantitativen/ qualitativen Bestimmung von Alkali und Erdalkalimetallen
!MESSUNG DER LICHT-EMISSION
WIe funktioniert die qualtitative und qualitative Bestimmung der Flammenemmissionsphotometrie
Qualitative Bestimmung: Valenzelektronen sind angeregt und erzeugen beim Abfallen auf ursprüngliches Energieniveau Licht einer Elementspezifischen Wellenlänge --> Element wird in Flamme gesprüht
Quantitative Bestimmung: um so mehr Atome vorhanden, um so intensiver die ausgesendete Strahlung; es wird Substanzgemisch in Flamme gesprüht -> Llinienspektrum der versch. Elemente
Beschreibe die Atomabsorptionsphotometrie/spektrometrie
Methode zur qualitativen/quantiativen Bestimmung von Elementen durch Messung der Absorption optischer Strahlung durch freie Atome im Gaszustand
Nur Atome die dem Element der Hohlkathodenlampe entsprechen absorbieren Licht -> je mehr absorbiert um so schwächer der Restlichtstrahl
Beschreibe kur die Flourimetrie
Methode zur Konzentrationsbestimmung von floureszierenden Substanzen
Intensität der ermittelten Strahlung proportional zur Konzentration des gelösten Floureszenzfarbstoffes
-> Emission gemessen
