Blut und Abwehr
Km.
Km.
C 14
Wo? Monozyten LEITMARKER
Was? Rezeptor für LPS-LBP Komplex
Lipopolysaccharid - LPS binding protein
C 16
Wo? NK Zellen, Neutrophile, Makrophagen
Was? niedrig affiner Fc gamma Rezeptor III
CD19
Wo? reife B Zellen, Leitmarker
Was? spezifischer Teil des Komplementrezeptors CR2 im Komplex mit CD 21
CD 20
Wo? B Zellen , Leitmarker
Was? Ca Kanal
CD 21
Wo? B Zellen, Leitmarker
Was? bildet mit CD19 den CR2, Rezeptor für C3d und EBV
CD25
Wo? aktivierte T Zellen, B Zellen, Makrophagen
Was? alpha Kette des IL 2 Rezeptors
CD 34
Wo? Leitmarker für hämatopoetische Stammzellen
Was? Adäsionsmolekül
CD 35
Wo? B Zellen, Plasmazellen, Granulolzyten, T Zellen Erythrozyten
Was? Komplementrezeptor CR1
CD 40
Wo? B Zellen
Was? costimulatorisches Signal für den Igklassenswitch
CD 45
Wo? alle Leukozyten -> LEITMARKER
Was? Tyrosinphosphatese: common leukozyte anitgen
CD 46
Wo? alle Leukozyten
Was? MCP ( membran co-factor) Inaktivator von Komplement
CD 55
Wo? alle Leukozyten
Was? DAF : decay accelerating factor: Inaktivator von Komplement
CD 56
Wo? NK Zellen, Leitmarker
Was? Adhäsionsmolekül
CD57
Wo? NK Zellen, einige T, B Zellen, Monozyten
Was? Oligosaccharid auf vielen Oberflächenproteinen
CD 66b
Wo und Was? Granulozyten Leitmarker
CD 80
Wo?auf APC
Was? Rezeptor für CD28, wichtiges costimulatorisches 2. Signal -> B7.1
CD 86
Wo? professionelle APC
Was? Rezeptor für CD28, wichtiges costimulatorisches 2. Signal
-> B7.2
CD 154
Wo? T Helferzellen
Was? Costimulatorisches Signal für B Zellen zum Immunglobulinklassenswitch und für Makrophagen zur intrazellulären Abtötung auch CD 40 L genannt
Was gibt das CD4 / CD8 Verhältnis an?
-> Beurteilung von HIV Infektionen,
für die Therapie ist die absolute TH Zellen Anzahl entscheidend
Normwert CD4/CD8 = 1,0-1,5
bei HIV Infektion meist <0.5
Leukozytenwerte bei Erwachsenen
:)
Was ist ein Epitiop?
Den Bereich, an den ein AK an ein AG bindet.
-> auf dem Antigen
Was ist ein Hapten + Carrier
Hapten: (chemisch)
Bereich am AG an dem der AK bindet, wenn dieses allein , ohne Carrier keine Immunantwort auslöst.
das Protein, an dem sich ein Hapten befindet bildet dem Carrier
Was ist die Funktion des Carriers ?
-> Bindungsort der T Zelle zur T Zellhilfe und damit zur AK Bildung
Def. Agglutination
Ausfällung korpuskulärer Teilchen
Def. Präzipitation
Ausfällung löslicher Teilchen
Beispiele für eine Agglutination
1. Sertotypieserung von Salmonellen
2. Nachweis von E.coli-Serovaren
3. Nachweis von Membran AG an Zellen
Outcherlony Technik
AK und AG diffundieren aus gegenüberliegenden Ausstanzungen im Gel kreisförmig aufeinander zu.
-> das Äquivalenzbereich bzw. das Präzipitat bildet eine gerade Linie
Verwendung der Ouchterlony Technik
Diagnostik von Autoantikörpern und Typ III Allergien
Vorteil: Erkennung von identische bzw. teilidentischen AK
-> AK aus dem Patienten
Ergebnisse im Outcherlony Test:
1. spezifische Präzipitationsbande
2. bogenförmiger Übergang
3. bogenförmiger Übergang + Sporn
4. Kreuzende Banden -> " gekreuzte Schwerter Doppelsporn "
1. in den Löchern befinden sich passende AG und AK
2. Bogenförmiger Übergang: in den beiden Löchern befindet sich das selbe Antigen in gleich Konzentration
3. Sporn: Teilidentität Bildung , das andere Antigen liegt in anderer Konzentration vor
4. Es liegt keine Identität vor
Immunelektropherese
Auftrennung von Serumproteinen einer Patientenprobe und eines Normalerums
Nach Auftrennung der Proteine wird parallel in einer Rinne Antiserum eingefüllt. Bsp: Anti-IGg
Die AG ( gerade Diffusionsfront) und AK (kreisförmige Diffusionsfront) diffundieren aufeinander zu und bilden bogenförmige Präzipitate
-> Vergleich Patientenprobe vs. Normalserum
Verwundung: Gammopathiediagnostik
Immunfixation
- Auftrennung eines Pat. Serums
- Überschichtung mit Anti IgG, Antig IgA, Anti IgM , Anti kappa + lambda
- unlösliche AG-AK Komplexe entstehen
- werden fixiert und mit farbstoff gekennzeichnet
- Präzipitate monoklonaler AK: SCHARF BEGRENZTE BANDEN
Turbidimetrie
Messung der Abschwächung der Lichtintensität beim Durchtritt eines Lichstrahles durch eine Flüssigkeitsschranke
-> verursacht durch den Tyndall Effekt durch AG-AK Komplexe
Nephelometrie
Messung des Streulichtes, das entsteht, wenn ein Lichtstrahl auf AK-AG Komplexe trifft
Was sind Coombs Seren ?
Seren, die gegen humane Immunglobuline gerichtet sind !
Einsatz in der Diagnostik als Sekundär AK zum Nachweis humaner Immunglobuline
Was ist der direkte Coombs-Test?
Nachweis humaner Erys, die inkomplette AK tragen,
erst die Zugabe des Coombs Serum führt zur Agglutination
Was sind inkomplette Antikörper?
Normale IgG Ak, die in vitro , beispielsweise durch eine Pufferlösung eine so geringe Bindungsaktivität aufweisen, dass sie nicht zur Agglutination führen
Was sind komplette Antikörper?
Antikörper gegen die Blutgruppeneigenschaften A und B , sind vom IgM Typ und haben daher eine hohe Avidität
Was ist der indirekte Coombs Test, wie läuft er ab ?
Nachweis inkompletter AK im Patientenserum Bsp: Mutter mit Rhesus AK
-> gegen bestimmte Oberflächen Antigene auf den Erythrozyten
Inkubation des Pat. Serum mit Test Erythrozyten, in Anwesenheit spezifischer Ak binden diese an die Test Erys und durch Zugabe eines Coombsserums werden die spez. AK erkannt und es kommt zu einer Agglutination
Die Zweiantikörper aus dem Coombsserum werden durch einen Fluoreszensfarbstoff sichtbar gemacht
Definition Kreuzprobe
serologische Verträglichkeitsprobe
Was ist der Majortest?
Muss vor jeder Transfusion durch geführt werden!!
Spendererythrozten mit dem Empfängerserum
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Cartes-fiches
Was ist ein Epitiop?
Den Bereich, an den ein AK an ein AG bindet.
-> auf dem Antigen
Was ist ein Hapten + Carrier
Hapten: (chemisch)
Bereich am AG an dem der AK bindet, wenn dieses allein , ohne Carrier keine Immunantwort auslöst.
das Protein, an dem sich ein Hapten befindet bildet dem Carrier
Was ist die Funktion des Carriers ?
-> Bindungsort der T Zelle zur T Zellhilfe und damit zur AK Bildung
Def. Agglutination
Ausfällung korpuskulärer Teilchen
Def. Präzipitation
Ausfällung löslicher Teilchen
Beispiele für eine Agglutination
1. Sertotypieserung von Salmonellen
2. Nachweis von E.coli-Serovaren
3. Nachweis von Membran AG an Zellen
Outcherlony Technik
AK und AG diffundieren aus gegenüberliegenden Ausstanzungen im Gel kreisförmig aufeinander zu.
-> das Äquivalenzbereich bzw. das Präzipitat bildet eine gerade Linie
Verwendung der Ouchterlony Technik
Diagnostik von Autoantikörpern und Typ III Allergien
Vorteil: Erkennung von identische bzw. teilidentischen AK
-> AK aus dem Patienten
Ergebnisse im Outcherlony Test:
1. spezifische Präzipitationsbande
2. bogenförmiger Übergang
3. bogenförmiger Übergang + Sporn
4. Kreuzende Banden -> " gekreuzte Schwerter Doppelsporn "
1. in den Löchern befinden sich passende AG und AK
2. Bogenförmiger Übergang: in den beiden Löchern befindet sich das selbe Antigen in gleich Konzentration
3. Sporn: Teilidentität Bildung , das andere Antigen liegt in anderer Konzentration vor
4. Es liegt keine Identität vor
Immunelektropherese
Auftrennung von Serumproteinen einer Patientenprobe und eines Normalerums
Nach Auftrennung der Proteine wird parallel in einer Rinne Antiserum eingefüllt. Bsp: Anti-IGg
Die AG ( gerade Diffusionsfront) und AK (kreisförmige Diffusionsfront) diffundieren aufeinander zu und bilden bogenförmige Präzipitate
-> Vergleich Patientenprobe vs. Normalserum
Verwundung: Gammopathiediagnostik
Immunfixation
- Auftrennung eines Pat. Serums
- Überschichtung mit Anti IgG, Antig IgA, Anti IgM , Anti kappa + lambda
- unlösliche AG-AK Komplexe entstehen
- werden fixiert und mit farbstoff gekennzeichnet
- Präzipitate monoklonaler AK: SCHARF BEGRENZTE BANDEN
Turbidimetrie
Messung der Abschwächung der Lichtintensität beim Durchtritt eines Lichstrahles durch eine Flüssigkeitsschranke
-> verursacht durch den Tyndall Effekt durch AG-AK Komplexe
Nephelometrie
Messung des Streulichtes, das entsteht, wenn ein Lichtstrahl auf AK-AG Komplexe trifft
Was sind Coombs Seren ?
Seren, die gegen humane Immunglobuline gerichtet sind !
Einsatz in der Diagnostik als Sekundär AK zum Nachweis humaner Immunglobuline
Was ist der direkte Coombs-Test?
Nachweis humaner Erys, die inkomplette AK tragen,
erst die Zugabe des Coombs Serum führt zur Agglutination
Was sind inkomplette Antikörper?
Normale IgG Ak, die in vitro , beispielsweise durch eine Pufferlösung eine so geringe Bindungsaktivität aufweisen, dass sie nicht zur Agglutination führen
Was sind komplette Antikörper?
Antikörper gegen die Blutgruppeneigenschaften A und B , sind vom IgM Typ und haben daher eine hohe Avidität
Was ist der indirekte Coombs Test, wie läuft er ab ?
Nachweis inkompletter AK im Patientenserum Bsp: Mutter mit Rhesus AK
-> gegen bestimmte Oberflächen Antigene auf den Erythrozyten
Inkubation des Pat. Serum mit Test Erythrozyten, in Anwesenheit spezifischer Ak binden diese an die Test Erys und durch Zugabe eines Coombsserums werden die spez. AK erkannt und es kommt zu einer Agglutination
Die Zweiantikörper aus dem Coombsserum werden durch einen Fluoreszensfarbstoff sichtbar gemacht
Definition Kreuzprobe
serologische Verträglichkeitsprobe
Was ist der Majortest?
Muss vor jeder Transfusion durch geführt werden!!
Spendererythrozten mit dem Empfängerserum
Was ist der Minortest?
Spenderserum mit Empfängererythrozyten
Kann bei regelmäßger AK Suche entfallen
Beside Test
-> VOR JEDER TRANSFUSION durch den Arzt
dient der Bestimmung der Blutgruppe des Empfängers
Im Test befinden sich Anti B, Anti B und Anti AB -> Antikörper
-> kommt es zur Agglutination heißt das , dass auf den Empfänger Erys die Antigene vorhanden sind die mit den jeweiligen AK reagiertt haben,
Bsp: Agglutination bei anti A und antii AB: Blutgruppe A
Was ist die positiv Kontrolle bei der Immunelektrophorese
Anti Human Serum K gegen alle humanen Serumproteine
Wer bildet im Immunelektrophorese Test eine sichelförmige Bande?
definierte Proteine -> monoklonale AK
Wer bildet im Immunelektrophorese eine gerade Bande bzw. einen Schweif?
polyklonale AK,
Welchen Vorteil hat die Immunfixation gegenüber der Immunelektrophorese?
Man sieht, dass man das Patientenserum verdünnen muss -> unspezifische Kontrolle
Falsch negative Resultate durch Auslöschung werden vermieden
Ursachen für Konzentrationsänderungen von Komplementfaktoren:
- vermehrter in vivo Verbrauch
- verminderte in vivo Produktion
- in vitro Verbrauch nach der Blutabnahme
Der Mangel an Komplementinhibitoren führt zu ?
Autoimmunerkrankungen
Wann kann ein Komplemetabfall als Folgedefekt auftreten?
- durch Medikamente
- Abfall durch Proteinsynthesestörung -> Leberzirrhose
Nenne Erkrankungen mit ausgedehnter AG-AK Reaktion:
1. Autoimmunerkrankungen
Bsp: Lupus erythematodes
2. Glomerulonephritis
-> Auslöser: Immunkomplexe, Schädigung läuft aber über den alternativen Weg ab
Was macht C3NefF ( C3 Nephritischer Faktor )
-> Ist ein Autoantikörper, gegen die C 3 Konvertase des alternativen Weges gerichtet, speziell gegen das Kontrollprotein H
-> Konvertase wird stärker aktiviert, hohe C3 Anreicherung
-> ungesteuerter hoher Komplementverbrauch
-> konsekutive Hypocomplementämie
Verwendung von Komplement
- Komplementbindungsreaktion
- negative Zellisolierung
- Zytotoxizitätstest
Bestimmung von Komplement
CH 50 : Komplementgesamtaktivität
AP: Complementaktivität des alternativen Wegs
Bestimmung der einzelnen Komplementkomponenten
Bestimmung der Aktivität einzelner Komplementkomponenten durch Akitvitätsmessung mit Mangelseren
Was ist der Titer?
Der Kehrwert der höchsten Verdünnungsstufe, in der noch eine biologische Aktivität nachgewiesen werden kann.
Complementhämolyse:
Lyse der Erythrozyzen, je stärker die Erys lysiert wurden, desto größer ist der Messwert im Photometer
-> Hämoglobinkonzentration
Zur welcher Labordiagnostik kann der Fluoreszenztest dienen?
Virusinfektionen und Bestimmung virusspezifischer Antikörper
Wie funktioniert der IFT?
-> Fluochrom-markierte AK
Bsp: FITC ( Flouresceinisothiocyanat) und PE ( Phyocoerythrin )
direkter IFT: Antigennachweis
indirekter IFT: Antikörpernachweis
Beispiele für Routinediagnostik mit IFT
- Herpesvirus
- Hanatvirus
- HIV Infektion
- Parovirus B 19
Ablauf des Westernblots
1. Auftrennung Erreger-spezifischer AG
2. Überführung der Proteine/Glycoproteine auf eine Nitrozellulose- oder Teflonmembran überführt = Westernblot
3. Westernblotmembran wird mit Proteinlösung inkubiert, um alle Bindungsstellen auf der Membran abzusättigen
4. Inkubation der Membran mit Patientenseren
5. Bindung Erreger spezifischer Antikörper aus dem Pat. Serum wird durch Reaktion mit einem Enzymgekoppelten sekundär AK sichtbar gemacht
-> Immunoblot
Es entsteht ein individuelles AK Muster, das für das Infektions- oder Krankheitsstadium charakteristisch ist.
Prozentuale Bestandteile der Leukozyten
65 % Granulozyten
30 % Lymphozyten + NK Zellen
5% Monozyten
