Histologie 3

Antigen-Antikörper + Sichtbarmachung

Direkt oder Indirekt

Direkt:
-weist AG mit nur einem AK nach

Indirekt:
-weist AG mit 2 (Primär& sekundär) AK nach -> Sensitiver

 

Nur durch die Fixation werden AG überhaupt dem IHC-Nachweis zugänglich gemacht


MERKE:
zu lange oder zu kurz Fixiert = falsch negativ
 

wenn das Gewebe zu lange im Formalin gelegen hat

-> kann nicht mehr demaskiert werden = Falsch negativ

•Tumor-/Lymphomdiagnostik

•Erregerdiagnostik

•Bestimmung von prognostischen Faktoren

•Bestimmung therapierelevanter Faktoren

•Antigendemaskierung
-rückgängig machen der Fixierung, wiederherstellung des 3Dimensionalem Epitop

•Endogener Enzymblock
-blockierung der Endogenen Enzymaktivität

•Primärantikörper
-bindet an die gesuchte Struktur auf dem Gewebe

•Sekundärantikörper
-bindet auf dem Primärantikörper -Markiert

•Visualisierung
-meist an Sekundär-AK gebunden (z.B Enzym, Bild)

•Gegenfärbung:
-je nach dem schwach/stark

Htze:
-Hitzevorbehandlung
-zunahme der Spezifität
-verringerung der Hintergrundfärbung

Enzymatischer Andau

Signal:
-Ja/Nein

Signal an der richtigen Struktur:
-falsch neg/pos

Signalstärke:
-wenig, mässig, stark

Hintergrundfärbung:
-wie stark mitgefärbt

Gegenfärbung:
-wie stark gegengefärbt