Biochemie - Fragen

Fragen zu Prüfung TP Biochemie

Fragen zu Prüfung TP Biochemie

42

0.0 (0)

M. B.

Study

M. B.

About these flashcards

Diese Lernkarten decken biochemische Konzepte auf Universitätsniveau ab. Sie konzentrieren sich auf Proteine, Antikörper und ihre Affinität, sowie auf Tests zur Bestimmung von Konzentrationen und Vitaminen. Die Karteikarten behandeln auch die Rolle von Eisen im Körper, die Verwendung von Plasmiden und die Auswirkungen von pH-Werten auf Proteine. Medizinstudierende und Biochemie-Interessierte profitieren von diesen Lernkarten, um ihr Verständnis von molekularen Prozessen und diagnostischen Methoden zu vertiefen.

Flashcards

42

Students

6

Language

German

Category

Medical

Level

University

Created / Updated

03.02.2019 / 05.06.2021

Wie viele Loci und Allele sind im AB0-System involviert?

1 Locus aber 4 Allele (A1, A2, B und 0)

Wie kann eine Mutter mit Blutgruppe AB ein Kind mit der BG 0 gebären?

Bombay-Phänotyp. Mutation auf Chromosom 19 führt zu einer fehlenden Produktion der Vorläufersubstanz H. EZ fehlt damit das entsprechende Antigen auf der Membran (scheinbarer 0-Typ).

Was ist das gefährliche am Bombay-Phänotyp?

Jeder AB0-Träger besitzt die Vorläufersubstanz H. Menschen mit Bombay haben aber bereits frühkindlich mit der Entwicklung von Antikörper gegen diese Substanz begonnen. Deshalb können nur Bombay-Blutspenden gegeben werden.

Was ist der Vorteil beim Messen der Absorption 1. ohne Ferrozin und 2. mit Ferrozin bei der Bestimmung des Serumeisens?

Andere Serumbestandteile (ausser Eisen) können auch eine Lichtabsorbierende Eigenschaft haben. Der Wert wäre dementsprechend nicht nur für das Eisen gemessen und zu hoch.

Wozu wird bei der totalen Eisenbindungskapazitätsbestimmung Magnesiumcarbonat benötigt?

Magnesiumcarbonat bindet nach Aufsättigung des Apotransferrins das überschüssige Fe3+ zu einem unlöslichen Komplex und kann so entfernt werden.

Warum ist Eisen an Proteine gebunden und nicht frei im Körper?

Es könnte gefährliche Sauerstoffradikale bilden.

Welche Moleküle können Eisen speichern?

Transferrin, Ferritin, Hämoglobin, Haptoglobin

Was sind die Hauptgründe für einen Eisenverlust?

Blutung, Mens, Schwangerschaft, EZ-Abbau

Was ist die Rolle von Guandinium-Hydrochlorid bei der Bestimmung von Serumeisen?

Zerstört die Struktur der Proteine und gibt das Eisen frei (welches dann über Ascorbinsäure von Fe3+ zu Fe2+ reduziert wird)

Wenn der pH sich von 5 auf 8 erhöht, wie verändert sich die Nettoladung der Proteine?

Alle Proteine senken ihre Nettoladung -> pH-Erhöhung führt immer zu einer Ladungsabnahme.

Wie sind Lysin, Glutaminsäure und Histidin bei pH 7 geladen?

Je näher man zum isoelektrischen Punkt kommt, desto eher ist das Protein bei 0. Glutaminsäure und Asparaginsäure immer negativ, Lysin immer basisch (IEP 9.59) also positiv. Histidin ist die AS, die bei physiologischem pH entweder ein Proton aufnehmen oder abgeben kann. Hälfte neutral, Hälfte . geladen

N-acetylneuraminic-Säure ist häufig als terminaler Zucker in Glycoproteinen vorhanden. Das C1-Atom befindet sich in einer Carboxylgruppe (-COOH). Wie verändert sich der isolelektrische Punkt (jetzt bei 4.8) wenn die neuramininc-Säure mithilfe von Neuramidase entfernt wurde?

Er erhöht sich (>4.8). Neuramidase spaltet das COO- weg -> verliert eine negative Ladung -> der isoelektrische Punkt wird in den alkalischen Teil verschoben -> dieses negative Teil muss wiederkommen, damit die gleiche Nettladung (ein positiv geladenes muss seinen positiven Teil abgeben.

Erkläre weshalb gamma-Globuline, hauptsächlich aus IgG gebildet, eine so breite Bande in der Elektroporese produzieren und warum dies bei einem gamma-Myelom nicht passiert und weshalb die Bande so scharf begrenzt ist.

IgG ist eine Population von Antikörpern, die sich auf molekularer Ebene alle ein bisschen unterscheiden
Im Grundzustand haben wir ganz viele verschiedene Antikörper. Aber wenn eine Bande sich herausbildet, so fangen die B-Zellen an, Milionen von diesem einen Antikörper zu produzieren und dieser bildet sich dann aus.
Gesunder Patient: breite IgG Bande. Ist Muster oben scharf -> Myleom

Warum kann bei der Elektrophorese HbS (Sichelzellen) von HbA (Wildtyp) bei pH 6 unterschieden werden, aber nicht bei pH 8.6?

Mutation: Glutaminsäure (-) wird gegen Valin (ungeladen) ausgetauscht. HbA verliert eine Ladung wenn es zu HbS wird. Bei pH 6 trennt man ein Molekül, das eine Ladung mehr hat als das andere. Bei pH 8 hat HbA 6 negative Ladungen und HbS 5 -> Unterschied viel geringer.

Wie kann eine Restriktionskarte durch die partielle Restriktion gemacht werden? Wie kann eine doppelte Digestion (mit 2 verschiedenen Restriktionsenzymen) helfen?

Kann unterschiedliche Grössen ergeben und die sind in der Gelektroporese sichtbar.
Doppelstrang kann in 2 Richtungen/Orientierungen eingesetzt werden (je nach Orientierung bekommt man grösseres Fragment). Wenn man das mit vielen Restriktionsenzymen durchführt, kann man genau Fragmente der Plasmide machen -> man bekommt Orientierung und Sequenz kann so bestimmt werden.

Ein DNA-Fragment eines Plasmids wurde mit einem Restriktionsenzym geschnitten und mit der gleichen Seite in ein anderes Plasmid eingefügt. Was kann man zur Richtung des DNA-Fragments im neuen Plasmid sagen?

Es ist möglich Fragment zu inserieren, aber das Problem: es könnte in 2 Richtungen inserieren (sieht zwar ähnlich aus, hat aber trotzdem eine Richtung -> kann sein, dass man bestimmte Richtung braucht wegen Promotor auf Plasmid, würde in falscher Richtung kein Protein geben beim Ablesen).

Um den ELISA-Test zu optimieren, wruden verschiedene Ab-Konzentrationen ausprobiert:

Weniger Ab als gebundenes Ag
Mehr Ab als gebundenes Ag
Viel mehr Ab als gebundenes Ag

Was sind die Auswirkungen?

Sensitivität des Tests ist auch bei geringer Menge des Testantigens gewährleistet: keine Saturation des Träger-gebundenen Antigens durch Bindung des markierten Antikörpers
Keine Sensitivität des Tests bei geringer Menge des Testantigens in der Probe (es würde nie zu einer Sättigung kommen)
Keine Sensitivität des Tests: Bindestelle des Träger-gebunden Antigens sind durch markierte Antikörper saturiert

Was ist der Grund dafür, dass im Immunoassays Carrier gebundene Antikörper oder Carriergebundene Antigene gebraucht werden?

Man kann sie sehr gut isolieren, was nicht gebraucht wird, kann einfach ausgewaschen werden.

Was zeigen RIA und ELISA?

RIA: Radioaktiv, kompetitiv

ELISA: Enzymkomponente auf Plastik, basiert auf Substratverwandlung

Wenn es möglich ist, einen bestimmten Antikörper für eine Substanz zu finden, kann ein anderes Protein mit hoher Affinität für den Analyt als spezifischer Detektor gebraucht werden. Bayer verkauft einen Test für die Bestimmung von Vitamin B12, bei dem ein radioaktiv markiertes Vitamin B12 genau wie der intrinsische Faktor als spezfisches Reagent gebraucht wird. Schlage ein mögliches Schema vor für diesen Test vor. Welche Komponenten sollten präsent sein etc.?

IF (Antikörper) bindet Vit. B12

IF könnte an der Plastikoberfläche immobilisiert werden -> Vit. B12 und radioaktives Vit. B12 dazugeben.

Galactose die ins Blut gelangt, nach trinken von Milch kann durch GOD/POD-Methode detektiert werden? Was könnte die GOD/POD verfälschen?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

Nein, da diese Glucose bevorzugt. Obwohl Galactose in gleichem Mass vorhanden ist (Lactose = Glucose + Galactose), wird sie nicht angezeigt. GlucoseOxidase kann zwar auch ein bisschen Galactose umwandeln, die Affinität von GOD ist aber sehr niedrig für Galactose und nur bei hoher Enzymkonzentration messbar.

Mannose könnte GOD/POD verfälschen, da etwas umgesetzt wird davon.

Referenzlabor A findet 6.4 mmol/L in Serum. B findet 7.9 mmol/L. Könnte der Temperaturunterschied (B hat höhere Temperaturen) dazu beigetragen haben?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

Nein. Es wird das Endprodukt (Plateau) gemessen. Die Temperatur hat nur Einfluss auf die Reaktionsgeschwindigkeit.

Wie ist deltaG für den Beginn der gesamten GOD/POD-Reaktion?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

Sehr negativ. Viel Edukt ist vorhanden, es wurde aber noch kein Produkt gebildet.

Zwei Testkits (A & B) für die Glucosedetermination GOD/POD werden verglichen. Beide enthalten die gleiche GOD-Konzentration, aber B enthält mehr Peroxidase (POD). Welches Kit liefert bei Hämoglobin und/oder Vitamin C Anwesenheit falsche Resultate? Warum?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

Hämoglobinpräsenz: Da Hb eine Peroxidaseaktivität hat, würde Kit B weniger stark verfälscht als Kit A, da es mehr POD hat.

Vitamin C Präsenz: Würde beide Kits gleich betreffen, da Vitamin C H2O2 zerstört, bevor POD wirken kann. So hat die Menge des Enzyms keinen Einfluss auf die Fehleranfälligkeit, da es gar nicht wirken kann.

Beurteilen des Blutzuckerwertes von einem Serum mit 2.64 mmol/L (nach dem Fasten)?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

Hypoglycämie. Es müssten über mehrere Monate hinweg noch Nüchterntests gemacht werden, um Diabetes festzustellen.

Wenn Blut bei Raumtemperatur lange gehalten wird, fällt oder steigt die Glucosekonzentration? Warum?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

Sie fällt, da die RBK Glucose verbrauchen. Hämolysieren die RBK, bauen ihre Enzyme Glucose ab.

Wie funktioniert ein Glucometer?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

Auf der GOD/POD-Methode: ES misst den Elektronenfluss von Fe3+ in Fe2+ Umwandlung.

Was sind die verschiedenen Formen von Calcium im Serum?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

Proteingebundenes (40-45%, Albumin)
Ionisiertes (freies 50%)
Chelatiertes Ca2+ (an Phosphate)

Wo in den Zellen ist Ca2+ v.a. vorhanden?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

In Mitochondrien und rER

Wie kann EDTA Calcium aus dem Komplex mit Methlythymolblau entfernen, obwohl es erst nach der Komplexbildung hinzugegeben wurde?

Keyboard commands:

= turn,

= for-/backward,

= scroll

Es hat eine viel höhere Affinität für Calcium als Methylthymolblau.

Warum kann bei einer Hyperventilation ein Tetanus entstehen?

Bei Hyperventilation entsteht eine respriatorische Alkalose und der Körper bildet vermehrt Kohlensäure aus Bikarbonat und H+. Die H+-Ionen binden dadurch nicht mehr an die Bindungsstellen des Albumins. Nun binden die Calciumionen daran -> weniger freie Ca2+-Ionen -> Hypokalzämie -> Aktivierung der Na-Ionenkanäle der Plasmamembran -> Kontraktion des Muskels bis zum Tetanus

Sollte die Standartkurve des Bradford-Experiments durch den Schnittpunkt der beiden Achsen verlaufen (0 Proteine und 0 Absorption)?

Nein, da Coomassie Blue bereits Proteine enthält. Wenn es aber kalibriert wird, sollte es durch den Nullpunkt gehen können. Die Werte können aber nicht in den negativen Bereich gehen, da es keine negative Absorption gibt.

Wie würde die Bradford-Standartkurve aussehen, wenn ein anderes Standartprotein genommen würde?

Andere Steigung, wegen anderer Affinität zu Farbstoff (flacher bei tieferer Affinität, steiler bei höherer).

Wenn man die Resultate eines Bradford-Versuches mit denen anderer Labore vergleichen möchte, warum muss dann dasselbe Standartprotein verwendet werden?

Die Konzentration eines Standarts sind bereits gegeben. Wenn ein anderer genommen wird, hat dieser auch andere Konzentrationen und der Vergleich wäre nicht derselbe. Muss vom gleichen Hersteller kommen.

Unter welchen Bedingungen ist die Bradford-Methode nicht optimal?

Bradford muss zwischen 0-2000 mikrogramm/mikroliter Proteine enthalten. Geht man weiter nach oben, flacht die Kurve ab
Bradford geht nicht mit Detergenzien und sehr alkalischen Bedigungen

Was ist der Hauptnachteil der Bradfordmethode?

Ist für eine genaue Quantifizierung nur eingeschränkt brauchbar.

Was heisst I.U./L. in den meisten Fällen?

International Unit/Liter

Beschreibt Enzymaktivität. Umsatz pro MInute pro Liter

Kann die Messung der GOT-Aktivität durch Präsenz von Glutamat Dehydrogenase verfälscht werden?

Ja. Glutamat-Dehydrogenase katalysiert die Umkehrreaktion. Es wird langsam Oxaloacetat aus dem GGW entfernt. Sobald die Glutamat-Konzentration hoch genug ist, wird NAD+ in NADH + H+ umgewandelt. Das entstehende NADH würde die Abnahmemessung des NADH beeinflussen.

Welche der folgenden Enzyme sind zellulär?

Pyruvat Kinase
Lactat Dehydrogenase
GOT
Acetylcholinesterase

Pyruvat-Kinase: Ja (Glucosekreislauf)
Lactat-Dehydrogenase: Ja (Glucosekreislauf)
GOT: Ja
Acetylcholinesterase: Nein (normalerweise schon im Serum freigesetzt)

Stimmt diese Aussage?

Die Aktivität der meisten menschlichen Enzyme erhöht sich, wennn die Temperatur von 25°C auf 37°C steigt, um den Faktor 2-4, WEIL das deltaG der meisten biochemischen Reaktionen von der Temperatur abhängt.

Aussage stimmt. Die Verknüpfung ist aber falsch.

1 / 42

Flashcards

Was zeigen RIA und ELISA?

RIA: Radioaktiv, kompetitiv

ELISA: Enzymkomponente auf Plastik, basiert auf Substratverwandlung

Wenn es möglich ist, einen bestimmten Antikörper für eine Substanz zu finden, kann ein anderes Protein mit hoher Affinität für den Analyt als spezifischer Detektor gebraucht werden. Bayer verkauft einen Test für die Bestimmung von Vitamin B12, bei dem ein radioaktiv markiertes Vitamin B12 genau wie der intrinsische Faktor als spezfisches Reagent gebraucht wird. Schlage ein mögliches Schema vor für diesen Test vor. Welche Komponenten sollten präsent sein etc.?

IF (Antikörper) bindet Vit. B12

IF könnte an der Plastikoberfläche immobilisiert werden -> Vit. B12 und radioaktives Vit. B12 dazugeben.

1
2

Study