Diagnostische Hämatologie
Hämatologie
Hämatologie
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Lernkarten
Nennen sie die Gebiete der diagnostischen Hämatologie
- Automatisiertes Blutbild
- Morphologie
- FACS
- Molekulare Diagnostik
- Hämostasiologie
- Immunhämatologie
- Zytogenetik
Welches Materialieb verwendet man in der Hämatologie für die Aufbereitung des Blutes?
- EDTA (für Lagerstabilität der Thrombozyten)
- Citrat (Antikoagulanz durch Calcium-Ionen entzug)
- Lithium-Heparin
Wie ist der grobe Ablauf einer hämatologischen Analyse?
Probenentnahme (Präanalytik Entnahmetechnik und Lagerung beachten)
Auftragserfassung
Automatisiertes Blutbild (vollautomatisch mit algorithmus)
Mikroskopische Differenzierung (Verteilungsmuster, rotes und weisses Blutbild)
Beurteilung (Freigabe oder nicht)
Was sind Indikatoren für eine Knochenmarkspunktion?
Allgemein Störungen im Knochenmark
- Störungen der Blutbildungen
- Maligne Erkrankungen des blutbildenden Systems
- Tumore
- Infekte (parasität, bakteriell)
Was ist eine punctio sicca?
Als Punctio sicca wird eine Knochenmarkspunktion ohne Gewinnung von Aspirat (z.B. aufgrund einer hochgradigen Fibrose) bezeichnet.
z.B. Haarzellleukämie
Was sind die typischen Symptome einer Anämie?
- Blasse Haut (v.a. Schleimhäute)
- Zunahme der Herzfrequenz
- Rasche Ermüdung
- Schwarzwerden und Schwindel nach Aufstehen
Wie ist die Definition einer Anämie?
Mangel an Erythrozyten, Hömokrit oder Hämoglobin
Was sind Ursachen für verminderte Hämoglobin Produktion?
- Eisenmangel
- Thalassämie
- chronische Krankheiten
- Bleivergiftung
Was sind veränderte Parameter bei Eisenmangel?
- MCV < 80 fl
- MCH < 27 pg
- Ferritin (Widerspiegelt die Eisen-Reserve; Entzündung und Tumor verfälscht)
- Eisen (starke Schwankungen bei Hämolyse und Entzündung)
- Transferrin (Widerspiegelt die Eisentransport-Kapazität)
Wie reagiert der lösliche Transferrin Rezeptor auf einen Eisenmangel?
Der lösliche Transferrinrezeptor widerspiegelt die Eisenbedürfnisse der Erythroblasten
Bei einem Eisenmangel steigt sTfR bevor eus zu einem signifikanten Abfall des Hämoglobins kommt.
sTfR wird vorallem bei fester Anämie und nicht bei beginnender Anämie festgestellt
Was ist eine Thalassämie?
Eine Thalassmie ist auf genetische Defekte zurückzuführen, die die Hämoglobinsynthese stören.
Man unterscheidet alpha oder beta Thalassämie, je nach Kette deren Produktion betroffen ist.
Das Ungleichgewicht der Ketten führt zu einer verminderten Hämoglobinbildung
Maßgeblich ist neben der Art der Thalassämie, ob das Thalassämie-Gen homozygot oder heterozygot ausgeprägt ist.
Welche Form haben Erythrozyten bei einer Thalassämie?
Wie eine Targetzelle (Target=Zielscheibe)
Wie werden makrozytäre Anämien eingeteilt? Welche Ursachen gibt es für die jeweilgen Anämien?
megaloblastisch
- Vitamin B12 und Folsäuremangel
nichtmegaloblastisch
- Alkohol, Leberkrankheiten
Was ist die reaktive Linksverschiebung?
Unter einer Linksverschiebung versteht man in der Hämatologie das vermehrte Auftreten von unreifen neutrophilen Granulozyten bzw. Granulozyten-Vorstufen im Differentialblutbild
Warum sind Lymphozyten verändert nach einer Mononukleose Infektion?
Der Epstein-Barr-Virus nistet sich in B-Lymphozyten ein und verändert diese.
Wie funktioniert das MGG Färbungs-Prinzip?
Basische Farbstoffbestandteile bilden mit sauren Zelleiweissanteilen eine Farbsalzbildung bzw. saure Farbstoffkomponenten mit basisch reagierenden Zellsubstanzen
- Die Erythrozyten sind rosa
- Kerne der Leukozyten und kernhaltige Erythrozyten rotviolett
- Eosinophile Granula ziegelrot bis rotbraun
- Basophile Granula dunkelviolett bis schwarz
- Neutrophile Granula hellviolett
- Zytoplasma der Lymphozyten hellblau
- Monozytenzytoplasma graublau
Wie werden Erythrozyten charakterisiert?
Grösse, Hb-Gehalt, Form der Ec
Nennen sie die Leukozytenpopulationen und identifizieren sie sie.
Basophile Granulozyten
- Blau-schwarze, grobe Granula im Zytoplasma, oft den Kern überdeckend. Kernform unregelmässig, kaum segmentiert
Eosinophile Granulozyten
- Meist sehr dicht liegende, kugelförmige, grobe rote Granula im Zytoplasma. Kern hat meist nur 2 Segmente
Neutrophile Granulozyten
- Stabkernige, segmentkernige
- Granulierung im fein, weder deutlich rot oder blau
- Kern der reifen Zelle hat 3-5 Segmente und eine grobbalkige Chromatinstruktur
Lymphozyten
- Kleine Lymphozyt: meist runden, festen Kern, schmalen blauen Zytoplasmasaum
- Grosser Lymphozyt: Kern mit lockereren Chromatinstruktur und breiteren hellblauen
- Zytoplasmasaum, häufig Azur- Granula im Zytoplasma
Monozyt
- Grösste Zelle des peripheren Blutes
- Zytoplasma grau-blau, meist mit zarter Azur- Granula, kern mit zarter Struktur, chromatinarm (rel.hell) und meist gelappt oder nierenförmig
Was ist eine Linksverschiebung?
Eine Linksverschiebung ist das Auftreten von jungen in der Entwicklungsstufe links liegende Zellen im Blut. Bei Granulozyten wird das Alter anhand der Kernform bestimmt.
Wie werden Malaria-Plasmodien nachgewiesen?
- Mikroskopischer Nachweis im Blut
- MGG-Färbung oder Giemsa-Färbung
- EDTA-Blut wird verrührt und nach MGG gefärbt
- Auch immunologische Schnelltests
Was ist die erste und was die zweite Hämostase?
Primäre Hämostase (Blutstillung)
- Vasokonstriktion
- Thrombozyten verschliessen die Wunde
- Weisser Thrombus
Sekundäre Hämostase
- Wundverschluss
- plasmatische Gerinnung mit Gerinnungsfaktoren
- Fibrinnetz
- Roter Thrombus mit Erythrozyten
- Einlagerung Bindegewebe
Was ist eine Thrombozytopenie? Was sind die Merkmale? Was ist eine Pseudothrombozytopenie?
Unter einer Thrombozytopenie versteht man eine verminderte Anzahl (<150.000/µl) von Blutplättchen (Thrombozyten) im Blut.
- Mangel an Thrombozyten
- Keine oder schwache Blutstillung (leicht, deutlich, potentiell bedrohlich)
- Pseudothrombozytopenie --> Messfehler ausgelöst durch AK Bindung an Thc durch EDTA
Was bedeudet HIT? Welche zwei Typen gibt es?
Heparininduzierte Thrmbozytopenie (HIT)
Effekt tritt auf bei Heparintherapie
Typ 1:
- nicht-immunologisch
- bei unfraktioniertem Heparin
- Adenylatcyclase wird durch Heparin gehemmt und löst Aggregation der Thrombozyten aus
- Gefahr für Blutungen und Thrombosen
Typ 2:
- v.a. bei unfraktioniertem Heparin
- Antikörper gegen Heparin und Plättchenfaktor 4
- Gefahr für Thrombose
Wie kann die Thrmbozytenfunktion getestet werden?
Funktionsstörungen können angeboren sein oder durch Medikamente (Thrombozytenaggregationshemmer) induziert sein.
- Durch die Blutungszeit (Gerinnungszeit von Schnitten gemessen)
- Durch Plättchenfunktionsanalyser PFA (Stillstand des Blutes durch eine Kapillare)
- Aggregometrie (Zunahme der Lichttransmission wenn Gerinnung)
- Durchflusszytometrie (Fluorezenzmarkierte AK gegen Membranproteine von Thc)
Was sind mögliche Ursachen einer Thrombozytopenie?
- Heparintherapie
- Bildungsstörung
- Gesteigerter Umsatz (Sie werden verbraucht bei einem Wundverschluss)
- Malaria
Was ist endogene/intrinsische Blutgerinnung?
Verletzungen innerhalb des Gefässes
Was ist exogene/extrinische Blutgerinnung? Ist sie eher schnell oder langsam?
Grössere Verletzungen ausserhalb, muss schnell passieren
Warum ist Ca2+ wichtig bei der Blutgerinnung?
Es aktiviert mit Faktor X Prothrombin zu Thrombin
Thrombin setzt Fibrnogen zu Fibrin um. (Roter Thrombus)
Charaktersisiern sie die Thromboplastinzeit (Anwendung, Messmethode, Interpretation).
- Wofür wird es bestimmt?
- Was misst es?/Wie wird es gemessen?
- Was sagen die Resultate?
- Überwacht das extrinsische System
- Marcoumartherapieüberwachung
- Mangel an Faktoren
- Leberfunktionsstörungen
- Vitamin-K-Mangel
Inkubation von Citratplasma mit Thromboplastin und Ca2+ löst Gerinnung aus und die Zeit bis zur Fibrinbildung wird gemessen. Errechnet wird INR oder Quick
- Kugelkoagulometrie
- Manuelle Messung
- Schnittger-Gross-Koagulometer
- Turbidimetrisch (Trübung)
- Point of Care Anwendung
Resultate..
- ..von Reagnezien abghängig
- INR Wert ist ein Ratio (standardisiert)
- Quick ist in %
- Bei verlängerter TPZ mus die Thrombinzeit (TZ) gemessen werden
Charakterisieren sie die aPTT (aktivierte partielle Thromboplastinzeit) (Anwendung, Messmethode, Interpretation)
- Warum wird gemessen?
- Was wird gemessen?/Wie wird gemessen?
- Was sagen die Resultate aus?
- Überwachung des intrinischen Systems
- Bei Heparintherapieüberwachung
- Selektiver Mangel von Einzelfaktoren
Es wird eine Plasmaprobe mit Phospholipiden und einem Oberflächenaktivator + Ca2+ inkubiert und die Zeit bis zur Fibrinentstehung gemessen.
Messmethoden analog zur Thromboplastinzeit
Resultate...
Thrombinzeit muss gemessen werden
Charakterisieren sie die Messung von Fibrinogen (Anwendung, Messmethode, Interpretation)
- Warum wird gemessen?
- Was wird gemessen?/Wie wird gemessen?
- Was sagen die Resultate aus?
- Fibrinogen ist ein wichtiger Vorläufer des Fibrins. Erhöhte Werte weisen auf Gallenabflussstörung, Krebs, Entzündungen hin.
- Potentieller erhöhter Verbrauch
Die Probe wird mit einem Überschuss von Thrombin und Calciumchlorid inkubiert, Gerinnung hängt darum vom Fibrinogengehalt ab.
Die Resultate weisen auf Fibrinogenstörung hin
Charakterisieren sie die messung von D-Dimeren (Anwendung, Messmethode, Interpretation)
Anwendung:
D-Dimere sind ein Risikomarker bei venöser Thromboembolie. D-Dimere werden bei der Fibrinolyse durch Plasmin vom Fibrinnetz abgespalten.
Messmethode:
Immunoassay mit Antikörper gegen Quervernetzeregion der D-Dimere
Interpretation:
Erhöhungen weisen auf eine aktive Fibrinolyse bei thromboembolischen Situationen hin.
Ausschluss von thromoembolischen Erkrankungen
Was sind die Indikationen (Anwendungsgebiete) der Blutgruppenbestimmung?
- Transfusionsbehanldungen
- Vermeidung und Klröung von Transfusionszwischenfällen
- Transplantationen
- Schwangerschaftsvorsorge
- Gerichtsmedizin
- Diagnostik von Neugeborenenerythoblastosen
Erklären sie das Blutgruppensystem AB0
genetisch
physiologisch
Vier Gene auf Chromosom 9; Allele A1, A2, B, 0
H-Gene auf Chromosm 19 codieren H-Transferasen und bilden H-Antigene
Liegen Allele A1, A2, B vor werden die H-Antigene über A1, A2, B Transferasen zu Antigenen A1, A2 und B (auf den Ec)
Liegt Allel 0 homozygot vor bleiben die H-Antigene bestehen (H-Antigene) Blutgruppe 0
- Blutgruppe A: Anti-B AK
- Blutgurppe B: Anti-A AK (A1 und A2)
- Blutgruppe 0: Anti-A und Anti-B
- Blutgruppe AB: Keine AK
Was sind Isoagglutinine?
Isoagglutinine sind IgM-Antikörper im AB0-System, es gibt Isoagglutinin Anti-A und Anti-B. Sie kommen komplemetär zur Blutgruppe im Blut vor. IgM AK sind im Stande Quervernetzungen zu machen und so das Blut zu verklumpen. IgG AK sind Isohämolysine (da sie die Ec lysieren).
Sie sind der grund für agglutinierende Transfusionsreaktionen bei Transfusin falscher Blutgruppen.
Erklären sie das Rhesus-Blutgruppensystem
Allel D (vorhanden positiv oder nicht negativ) auf Locus 1 Chromosom 1
bildet Rhesus-Antigen
Allele C,c,E,e auf Locus 2
Antikörper werden selten natürlich gebildet, sondern nach Immunisierung mit Antigen (meistens IgG)
IgG passieren die Plazenta und lysieren dort Ec mit Rhesus-D-Antigen
Wiefunktioniert der Röhrchentest?
Bestimmung der Blutgruppen Antigene
- Testlösung mit Antikörper (Isoagglutinin) zum Beispiel Anti-A
- Erythrozytensuspension zugeben
- Lösung zentrifugieren
- Über Lichtquelle aufschütteln
- Agglutionation oder homogene Mischung
Gegenbestimmung der Isoagglutinine
- Testlösung mit Ec (Blutgruppen A1, A2, B, 0)
- Serum des Patienten
Autokontrollen
- Serum und Ec des Patienten dürfen nicht agglutinieren (Verwechslung!)
Wie funktioniert der Geltest?
- In einem Röhrchen befinden sich Agarose-Kugeln mit entsprechenden AK auf der Oberfläche der Säule.
- Ungebundene Ec können während der Zentrifugation durch die Säule dringen.
- Gebundene agglutiniere Ec können nicht durch die Säule dringen und bleiben an der Oberfläche.
Blutgruppen-Antigene und Isoagglutinine werden getestet (Serum und Ec)
Erklären sie den direkten Coombs-Test:
Der direkte Cooms-Test (Anti-human-globulin-test) weist bereits in vivo sensibilisierte Ec nach, die mit IgG Antikörpern und nicht mit IgM Antikörpern anti-human-antikörper sensibilisiert wurden.
Diese wurden gebildet bei:
- Neugeborenenhämolyse
- Transfusionszwischenfälle
- Positiven Autokontrollen
- Positiven Isoagglutininbestimmungen
- Positiven Rhesuskontrolle
Das Coomb-Serum bindet mit den sensibilisierten Ec und der Komplex agglutiniert.
Erklären sie den indirekten Coomb-Test
Der indirekte Coomb-Test wird abgewendet wenn:
- Verträglichkeitsprobe
- Antikörper-Suchtest
- Antikörper-identifikation
- Antikörpernachweis (Schwangerschaft)
Die IgG-Antikörper werden in vitro an die Ec gebunden.
So können Antikörper oder Antigene nachgewiesen werden, die im regulären Test nicht erfasst werden können.
Mit Coomb-Substrat werden die sensibilisierten Ec agglutiniert.
